[发明专利]分子标记及其应用有效
申请号: | 201710413515.8 | 申请日: | 2017-06-05 |
公开(公告)号: | CN108220287B | 公开(公告)日: | 2021-10-15 |
发明(设计)人: | 张耕耘;倪雪梅;侯军亮 | 申请(专利权)人: | 深圳华大生命科学研究院;深圳华大三生园科技有限公司;深圳市华大农业应用研究院;中国农业科学院深圳生物育种创新研究院 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6895 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 赵天月 |
地址: | 518083 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种水稻拒镉性状相关的分子标记,其特征在于,所述分子标记为SEQ ID NO:3所示核苷酸序列;
具有SEQ ID NO:3所示核苷酸序列且在所述分子标记位点纯合的个体,表现为不具有拒镉性状;缺失SEQ ID NO:3所示核苷酸序列且在所述分子标记位点纯合的个体,表现为具有拒镉性状;具有SEQ ID NO:3所示核苷酸序列且在所述分子标记位点杂合的个体,表现为具有拒镉性状。
2.一种用于检测权利要求1所述的分子标记的引物对,其特征在于,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO:1-2所示。
3.一种用于检测权利要求1所述的分子标记的试剂盒,其特征在于,包含:
权利要求2所述的引物对。
4.一种检测权利要求1所述的分子标记的方法,其特征在于,利用权利要求2所述的引物对,或者权利要求3所述的试剂盒,对待测水稻基因组DNA进行PCR扩增并判断扩增产物中是否存在该分子标记。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,
利用所述引物对对待测水稻基因组DNA进行PCR扩增,并检测扩增片段的长度,当所述扩增片段长450bp时,所述待测水稻缺失SEQ ID NO:3所示核苷酸序列的插入,表现为具有拒镉性状;当所述扩增片段长500bp时,所述待测水稻具有SEQ ID NO:3所示核苷酸序列,表现为不具有拒镉性状;当所述扩增片段为500bp和450bp两种时,所述待测水稻的所述分子标记位点杂合,表现为具有拒镉性状。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,利用凝胶电泳检测所述扩增片段的长度。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,利用琼脂糖凝胶电泳检测所述扩增片段的长度。
8.权利要求1所述的分子标记、权利要求2所述的引物对、或者权利要求3所述的试剂盒,在水稻拒镉性状基因定位、水稻拒镉性状检测或者水稻辅助育种中的用途。
9.一种水稻拒镉性状基因定位的方法,其特征在于,所述方法包括使用权利要求1所述的分子标记的步骤。
10.一种检测水稻拒镉性状的方法,其特征在于,
对待测水稻进行权利要求1所述的分子标记的检测,以便确定所述待测水稻的拒镉性状。
11.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述方法包括:
利用权利要求2所述的引物对,或者权利要求3所述的试剂盒,对所述待测水稻基因组DNA进行PCR扩增;
检测扩增片段的长度;以及
基于所述扩增片段的长度,确定所述待测水稻的拒镉性状,
其中,当所述扩增片段长450bp时,所述待测水稻具有拒镉性状;当所述扩增片段长500bp时,所述待测水稻不具有拒镉性状;当所述扩增片段为500bp和450bp两种时,所述待测水稻的所述分子标记位点杂合,具有拒镉性状。
12.根据权利要求11所述的方法,其特征在于,利用凝胶电泳检测所述扩增片段的长度。
13.根据权利要求11所述的方法,其特征在于,利用琼脂糖凝胶电泳检测所述扩增片段的长度。
14.一种水稻辅助育种方法,其特征在于,所述方法包括检测权利要求1所述的分子标记的步骤。
15.根据权利要求14所述的方法,其特征在于,利用权利要求2所述的引物对,或者权利要求3所述的试剂盒,进行所述检测。
16.根据权利要求14所述的方法,其特征在于,所述方法包括:
通过权利要求10~13任一项所述的方法,检测所述分子标记,以便确定待测水稻的拒镉性状。
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