[发明专利]基于OCTS-CAR的抗PSCA及PDL1双靶向嵌合抗原受体、编码基因及表达载体

权利要求书

1.一种基于OCTS-CAR的抗PSCA及PDL1双靶向嵌合抗原受体，其特征在于，包括依次串联连接的CD8 leader膜受体信号肽、双抗原结合区、CD8 Hinge嵌合受体铰链、CD8Transmembrane嵌合受体跨膜区、CD28嵌合受体共刺激因子、OX40嵌合受体共刺激因子以及TCR嵌合受体T细胞激活域，

其中，所述双抗原结合区包括以串联或转角连接方式连接的PSCA以及PDL1单链抗体的重链VH和轻链VL、抗体内铰链Inner-Linker以及单链抗体间铰链Inter-Linker；

编码所述CD8 leader膜受体信号肽的基因序列如SEQ ID NO.15所示；编码PSCA单链抗体轻链VL的基因序列如SEQ ID NO.16所示，编码PSCA单链抗体重链VH的基因序列如SEQ IDNO.17所示；编码PDL1单链抗体轻链VL的基因序列如SEQ ID NO.18所示，编码PDL1单链抗体重链VH的基因序列如SEQ ID NO.19所示；编码抗体内铰链Inner-Linker的基因序列如SEQID NO.20所示；编码单链抗体间铰链Inter-Linker的基因序列如SEQ ID NO.21所示；编码所述CD8 Hinge嵌合受体铰链的基因序列如SEQ ID NO.22所示；编码所述CD8Transmembrane嵌合受体跨膜区的基因序列如SEQ ID NO.23所示；编码所述CD28嵌合受体共刺激因子的基因序列如SEQ ID NO.24所示；编码所述OX40嵌合受体共刺激因子的基因序列如SEQ ID NO.25所示；编码所述TCR嵌合受体T细胞激活域的基因序列如SEQ ID NO.26所示。

2.包含权利要求1所述的编码基于OCTS-CAR的抗PSCA及PDL1双靶向嵌合抗原受体基因的重组表达载体，其特征在于，还包括：

表达载体以及人EF1α启动子，

其中，人EF1α启动子的基因序列如SEQ ID NO.14所示，

所述表达载体为慢病毒表达载体、逆转录病毒表达载体、腺病毒表达载体、腺病毒相关病毒表达载体或质粒。

3.包含权利要求1所述的编码基于OCTS-CAR的抗PSCA及PDL1双靶向嵌合抗原受体基因的重组表达载体，其特征在于，还包括：

表达载体、人EF1α启动子以及编码PDL1单链抗体的基因，

其中，人EF1α启动子的基因序列如SEQ ID NO.14所示，编码PDL1单链抗体的基因序列如SEQ ID NO.27所示，

所述表达载体为慢病毒表达载体、逆转录病毒表达载体、腺病毒表达载体、腺病毒相关病毒表达载体或质粒。

4.根据权利要求2或3所述的包含权利要求1所述的基于OCTS-CAR的编码抗PSCA及PDL1双靶向嵌合抗原受体基因的重组表达载体，其特征在于：

其中，所述表达载体为第三代慢病毒表达载体pLenti-3G basic，该慢病毒表达载体包括含氨苄青霉素抗性基因AmpR序列、原核复制子pUC Ori序列、病毒复制子SV40 Ori序列、RSV启动子、慢病毒5 terminal LTR、慢病毒3 terminal Self-Inactivating LTR、Gag顺式元件、RRE顺式元件、env顺式元件、cPPT顺式元件、ZsGreen1绿色荧光蛋白、IRES核糖体结合序列、eWPRE增强型土拨鼠乙肝病毒转录后调控元件。