[发明专利]红细胞放散用的快速酸放散法有效
申请号: | 201710419901.8 | 申请日: | 2017-06-06 |
公开(公告)号: | CN107121326B | 公开(公告)日: | 2019-10-08 |
发明(设计)人: | 黄小燕;肖艳辉;柯紫君 | 申请(专利权)人: | 珠海贝索生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N1/38 | 分类号: | G01N1/38 |
代理公司: | 广东朗乾律师事务所 44291 | 代理人: | 杨焕军 |
地址: | 519000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 红细胞 放散 快速 | ||
1.红细胞放散用的快速酸放散法,用于放散红细胞表面结合的抗体,其特征在于,所述快速酸放散法包括步骤:红细胞的预处理、洗脱红细胞上的抗体、中和、取红细胞上放散下来的放散液进行检测;
所述红细胞放散用的快速酸放散法采用的试剂由洗脱液和中和液组成;
所述洗脱液的制备步骤包括:①称取1.0-10.0g氯化钠和10.0-20.0g甘氨酸,用蒸馏水或去离子水溶解,用盐酸调节PH值至1.9-2.5,定容至1000ml;②称取0.3-1.0g溴甲酚紫溶于100ml0.01mol/L氢氧化钠溶液中;将①和②按250-300:1比例混匀后存储于2~30℃的温度中;
所述中和液的制备步骤包括:①称取1.0-10.0g氯化钠、10.0-20.0g三羟甲基氨基甲烷用蒸馏水或去离子水溶解,用盐酸调节PH值至8.9-9.5,定容至1000ml,存储于2~30℃的温度中。
2.如权利要求1所述的快速酸放散法,其特征在于,所述红细胞的预处理是指:取待检血样离心分离血浆,确保至少有1ml的压积红细胞;
用生理盐水洗涤待检红细胞4-5次,最后1次去尽上清,收集压积红细胞,留取最后一次洗涤液1ml。
3.如权利要求1所述的快速酸放散法,其特征在于,所述洗脱红细胞上的抗体是指:取洗涤后的压积红细胞1ml,直接加入1ml洗脱液混合均匀,室温下反应10-15秒,立即以3400rpm离心1分钟;
离心完成后,迅速分离红细胞和上清液,用吸管吸取上清液转移入另一试管。
4.如权利要求1所述的快速酸放散法,其特征在于,所述中和是指:分离的上清液中滴入中和液,边滴边摇匀,液体颜色由黄色变为蓝色即可。
5.如权利要求1所述的快速酸放散法,其特征在于,所述取红细胞上放散下来的放散液进行检测是指:取分离后的上清液以3400rpm离心1分钟,此时上清液即为红细胞放散液,标记清楚用于做抗体检测;
将洗涤步骤中留取的最后一次洗涤液和检测步骤中的红细胞放散液做平行检测。
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