[发明专利]荷叶碱在制备治疗二型糖尿病药物中的用途

说明书

技术领域

本发明属于中医药领域，经过试验发现荷叶碱能够促进细胞GLUT4(葡萄糖转运蛋白4)转运和摄取葡萄糖，可以用于治疗二型糖尿病的新药开发。

背景技术

二型糖尿病，又称非胰岛素依赖型糖尿病。二型糖尿病患者在整个糖尿病人群中占90％～95％。体内糖脂代谢异常是二型糖尿病的主要特征。在二型糖尿病发病的过程中，开始患者的胰岛β细胞还有分泌胰岛素的能力，之后患者机体会产生胰岛素抵抗，导致胰岛β细胞代偿性分泌更多胰岛素来维持正常血糖水平。当患者的胰岛β细胞失去代偿能力之后，血糖水平升高，引起二型糖尿病。二型糖尿病的发病机理十分复杂，尚未完全阐明。目前的研究表明二型糖尿病与遗传和外界环境因素有关。胰岛素分泌缺陷和胰岛素抵抗是二型糖尿病的2个主要症状。如果未及时控制，二型糖尿病会导致一系列慢性并发症，例如心血管疾病、视网膜病变、肾功能衰竭等。目前临床已有一系列降糖药物用于改善二型糖尿病患者的血糖水平。目前应用较多的主要有双胍类药物，磺脲类药物和α-糖苷酶抑制剂等药物。而长期服用这些药物有较多副作用，例如肠胃不适和低血糖等。而近年研发的过氧化物酶体增殖物激活物受体γ激动剂噻唑烷二酮类药物也有引起体重增加和水肿等副作用。目前的研究证明二型糖尿病与葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达和转位缺陷有关。因此，可以针对GLUT4为靶点寻找筛选出治疗二型糖尿病的新药物。

荷叶碱，拉丁学名：folium nelumbinis，荷叶中的一种阿朴啡型生物碱，为荷叶中的主要降脂活性成分；以晒干粉碎的荷叶为原料，采用纤维素酶预处理、稀盐酸浸提、超声波辅助提取、氯仿萃取一系列方法提取而成。其中江西石城产区的荷叶含荷叶碱最高。中国发明专利201410628713.2提供了一种治疗糖尿病的药物组合物，该组合物由荷叶碱、葫芦素E、鞭打绣球苷B、海州常山苦素A配比而成，该专利中从中医的角度阐述了以上药物组合物治疗糖尿病的机理，并通过动物实验验证了以上药物组合物能够起到降低血糖的效果。

发明内容

本发明提供了荷叶碱的新的用途，检测了荷叶碱对细胞GLUT4表达和转运的影响，以及细胞葡萄糖摄取的实验。另外，本申请中还研究了荷叶碱的作用机理和相关信号通路。为研发荷叶碱药物用于治疗二型糖尿病提供了依据。

具体研究结论如下：

(1)荷叶碱能够促进L6细胞的葡萄糖摄取。

(2)荷叶碱能够促进L6细胞GLUT4的表达及转运。

(3)荷叶碱通过AMPK通路促进L6细胞GLUT4的转运；通过G蛋白-PLC-PKC信号通路促进L6细胞GLUT4的表达和转运。

本发明的有益效果为：通过检测细胞GLUT4表达和转运，以及细胞葡萄糖摄取的实验，发现荷叶碱具有促进GLUT4的表达及转运和葡萄糖摄取的功效，有望应用于缓解二型糖尿病引起的胰岛素抵抗，改善患者血糖水平。

虽然中国发明专利201410628713.2中提供了一种治疗糖尿病的药物组合物，该组合物由荷叶碱、葫芦素E、鞭打绣球苷B、海州常山苦素A配比而成，能够起到降低血糖的效果。但是已有专利中所提供的是药物组合物，由荷叶碱、葫芦素E、鞭打绣球苷B、海州常山苦素A配比而成共同发挥的药效。本申请中相比而言是荷叶碱单体应用在治疗2型糖尿病方面的保护。此外，已有专利中是从动物实验水平方面证实包括荷叶碱在内的组合药在糖尿病治疗方面具有效果。而本申请中是从细胞实验水平证明荷叶碱在治疗2型糖尿病方面的效果，包括荷叶碱对细胞GLUT4的表达和转运，以及细胞葡萄糖摄取的影响；还研究了荷叶碱的作用分子机理和相关信号通路，为研发荷叶碱药物用于治疗二型糖尿病提供了依据。

附图说明

图1为本发明实施例中的荷叶碱促进L6细胞的葡萄糖摄取效果图；

图2为本发明实施例中的荷叶碱促进L6细胞GLUT4转运效果图；

图3为本发明实施例中的荷叶碱促进L6细胞GLUT4表达效果图；

图4为本发明实施例中的荷叶碱促进L6细胞GLUT4的转运被AMPK信号通路抑制剂Compound C以及PKC信号通路抑制剂G蛋白抑制剂PTX、PLC抑制剂U73122抑制效果图；

图5为本发明实施例中的荷叶碱提高L6细胞PKC的磷酸化效果图；

图6为本发明实施例中的荷叶碱促进葡萄糖摄取的通路图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做详细具体的说明，但是本发明的保护范围并不局限于以下实施例。

1.细胞葡萄糖摄取实验：