[发明专利]一种检测沙丁胺醇的试纸条及其应用

说明书

本发明公开了一种检测沙丁胺醇的试纸条及其应用。试纸条包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)，所述反应膜上具有包被有沙丁胺醇半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有沙丁胺醇单克隆抗体‑胶体金标记物。本发明还提供了一种应用上述沙丁胺醇试纸条检测尿液、鸡肉、猪肉、鱼肉、虾肉、饲料中沙丁胺醇残留的方法。本发明所提供的试纸条具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。

技术领域

本发明涉及一种检测沙丁胺醇的试纸条及其应用，具体涉及一种用于检测沙丁胺醇的胶体金试纸条，其特别适用于尿液、鸡肉、猪肉、鱼肉、虾肉、饲料中沙丁胺醇残留的检测。

背景技术

沙丁胺醇是一种强效选择性β-受体兴奋剂药物，临床上常用于治疗支气管哮喘、哮喘性支气管炎和肺气肿患者的支气管痉挛等呼吸系统疾病。因此药可以提高瘦肉率，减少脂肪沉积和促进动物生长，被一些畜牧养殖企业作为养殖促进剂非法使用。其残留量可导致人体肌肉震颤、心悸、神经过敏、头痛、目眩、恶心、呕吐、发烧、战栗等症状，对消费者的健康极有危害，我国农业部发布的《食品动物禁用的兽药及其它化合物清单》明确规定沙丁胺醇等β-兴奋剂被禁止所有用途，禁用所有食品动物。

目前，对于沙丁胺醇的残留检测主要有高效液相色谱法、液相色谱～质谱联用分析法、气相色谱法、毛细管区带电泳法、免疫测定法等检测方法，仪器检测方法具有检测精确度高的优点，但其仪器化程度高，样品处理较复杂、检测费用高等，不适合用作大批样品的检测，免疫学检测方法操作简单、快速、灵敏，可同时检测多数样品，是理想的快速筛选手段。

发明内容

本发明的目的是提供一种灵敏度高、操作简单、成本低、检测时间短的沙丁胺醇残留检测试纸条。

本发明所提供的检测沙丁胺醇残留的试纸条，包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)；所述反应膜上具有包被有沙丁胺醇半抗原-载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有沙丁胺醇单克隆抗体-胶体金标记物。

所述沙丁胺醇半抗原-载体蛋白偶联物是由沙丁胺醇半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白可为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人血清白蛋白。

所述沙丁胺醇单克隆抗体是以沙丁胺醇半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，是由沙丁胺醇单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌获得；所述羊抗鼠抗抗体是将鼠源抗体免疫羊得到。

所述样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)依次粘贴在底板(7)上，所述结合物释放垫1/3～1/2被覆盖于样品吸收垫下。

所述底板可为PVC底板或其他硬质不吸水的材料；所述样品吸收垫可为吸滤纸或滤油纸；所述结合物释放垫可为玻璃棉或聚酯材料；所述吸水垫为吸水纸；所述反应膜可为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。

本发明的另一个目的是提供一种制备上述试纸条的方法，其包括步骤：

1)制备喷涂有沙丁胺醇单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；

2)制备具有包被有沙丁胺醇半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜；

3)将1)和2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。

具体地说，步骤包括：

1)半抗原制备：将4-(2-氨基-1-羟基乙基)-2-(羟基甲基)苯酚与半琥珀醛反应得到沙丁胺醇半抗原产物；

2)将沙丁胺醇半抗原与载体蛋白偶联，得到沙丁胺醇半抗原-载体蛋白偶联物；