[发明专利]一种玉米苞叶薄膜微萃取高效液相色谱法测定红酒中苏丹红I和II浓度的方法

说明书

本发明公开了一种玉米苞叶薄膜微萃取高效液相色谱法测定红酒中苏丹红I和II浓度的方法，属于苏丹红I和苏丹红II的定量分析方法技术领域。本发明的技术方案要点为包括玉米苞叶薄膜微萃取膜的制备、玉米苞叶薄膜微萃取高效液相色谱法测定标准曲线的绘制和红酒中苏丹红I和苏丹红II含量的测定等步骤。本发明的玉米苞叶薄膜微萃取高效液相色谱法操作简单、成本低廉、易于分离、抗干扰能力强且重复性好，具有较好的市场应用前景。

技术领域

本发明属于苏丹红I和苏丹红II的定量分析方法技术领域，具体涉及一种玉米苞叶薄膜微萃取高效液相色谱法测定红酒中苏丹红I和II浓度的方法。

背景技术

苏丹染料常被非法用于食品工业以模仿天然食品的颜色，进而增加其销售量。现在苏丹红染料及其代谢产物被证明对人类具有致癌、致畸、致突变的作用，大多数国家已明令禁止将苏丹红染料作为食品添加剂使用。因此，建立可靠、快速、有效且高灵敏度的测定食品中苏丹红的方法很有必要。

苏丹红的检测分析主要采用电化学检测、高效液相色谱法、薄层色谱法、电泳、核磁共振法等，这些方法有的前处理过程复杂、检测时间长，有的设备仪器昂贵、检测费用高，有的灵敏度低，有的检测组分单一。高效液相色谱法与不同的检测器联用是最广泛使用测定食品中苏丹红染料的技术。然而，由于样品基质的复杂性和分析物含量低，干扰测定结果的精密度和准确性，因此在色谱分析之前，样品的分离富集是至关重要的。

常用的分离富集苏丹红的方法有固相萃取和液相微萃取。但由于固相萃取过程繁琐，并且耗费时间和价格昂贵，液相微萃取低消耗、操作简单、溶剂消耗少、富集因子高但是重复性低。薄膜微萃取是一种新颖的固相微萃取技术，由于使用薄而宽的膜作为吸附剂提高了萃取相的比表面积，可以明显缩短萃取时间，提高萃取和传质效率，增加测定的灵敏度和萃取的回收率。因此，研发薄膜微萃取膜是发展薄膜微萃取技术的核心。

玉米苞叶用于保护、包裹玉米，由于其柔韧特性常被用于包装、编制等方面，更多的玉米苞叶都被当作燃料或被弃置不用，十分可惜。然而目前尚没有关于将玉米苞叶用作薄膜微萃取膜的相关报道。

发明内容

本发明解决的技术问题是提供了一种操作简单、成本低廉、易于分离、抗干扰能力强且重复性好的玉米苞叶薄膜微萃取高效液相色谱法测定红酒中苏丹红I和II浓度的方法。

本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，一种玉米苞叶薄膜微萃取高效液相色谱法测定红酒中苏丹红I和II浓度的方法，其特征在于具体步骤为：

(1)玉米苞叶薄膜微萃取膜的制备

将干燥后的玉米苞叶裁剪为1cm×4cm的薄膜，再将裁剪后的玉米苞叶超声清洗40min后于室温干燥得到玉米苞叶薄膜微萃取膜备用；

(2)玉米苞叶薄膜微萃取高效液相色谱法测定标准曲线的绘制

在一系列锥形瓶中分别加入1.0g NaCl、10.00mL体积比为1:20的乙醇与水的混合溶液和200μL不同质量浓度梯度的苏丹红I和苏丹红II标准溶液，再将玉米苞叶薄膜微萃取膜加入锥形瓶中并密封，然后以160rpm的转速于25℃振荡吸附3h，取出玉米苞叶薄膜微萃取膜在室温下晾干，用1.50mL甲醇洗脱10min，氮气吹干洗脱液后用0.20mL甲醇溶解，设定高效液相色谱仪的参数分别为C₁₈色谱柱，柱温25℃，流动相为纯甲醇，流速1mL/min，检测波长为478nm，依据配制样品的浓度及高效液相色谱仪得到的曲线绘制浓度-峰面积标准曲线；

(3)红酒中苏丹红I和苏丹红II含量的测定