[发明专利]用壳聚糖功能化的金纳米修饰玻碳电极检测酪氨酸的方法

权利要求书

1.一种用壳聚糖功能化的金纳米修饰玻碳电极检测酪氨酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、制备壳聚糖功能化的金纳米修饰玻碳电极：

a、将十六烷基三甲基溴化铵与去离子水混合搅拌均匀，再加入氯金酸溶液搅拌，加入NaBH₄冰水溶液搅拌，静置后得晶种溶液备用；

b、将十六烷基三甲基溴化铵、油酸钠和水混合搅拌均匀，冷却后加入AgNO₃溶液搅拌，加入氯金酸溶液搅拌，直至溶液由亮黄色变为澄清为止，然后加入浓HCl溶液搅拌，加入抗坏血酸溶液搅拌，以及加入晶种溶液搅拌，放置8～12h后得混合液A备用；

c、将混合液A与质量分数为0.5％wt的壳聚糖溶液按体积比为1:1混合，超声处理后，离心处理取沉淀，以5～8mg:1ml的质量体积比将沉淀分散于水中并超声处理后得微溶液，取该微溶液滴定于玻碳电极表面，晾干即得壳聚糖功能化的金纳米修饰玻碳电极；

步骤二、以步骤一制备的壳聚糖功能化的金纳米修饰玻碳电极作为工作电极，根据酪氨酸的差分脉冲伏安曲线，使用三电极体系差分脉冲伏安法对待测溶液中的酪氨酸的浓度进行检测；

还包括对壳聚糖进行预处理，具体为：将壳聚糖和CuSO₄置于去离子水中并在45～55℃下进行超声处理，超声频率为400kHz，超声时间为10～15min，再用红外烘干去除去离子水得到沉淀，其中，壳聚糖和CuSO₄质量比为1:0.05～0.1。

2.如权利要求1所述的用壳聚糖功能化的金纳米修饰玻碳电极检测酪氨酸的方法，其特征在于，步骤一中，

a具体为：将十六烷基三甲基溴化铵与去离子水混合，并在30～35℃水浴下搅拌10～20min，然后加入0.01mol/L的氯金酸溶液并搅拌5～10min后，加入质量体积分数为0.455g/L的NaBH₄冰水溶液，继续搅拌2～5min后静置30min以上即得晶种溶液，其中，十六烷基三甲基溴化铵、去离子水、氯金酸溶液和NaBH₄冰水溶液的质量体积比为0.7～0.75g:18～20ml:0.5～0.8ml:0.8～1.2ml；

b具体为：将十六烷基三甲基溴化铵、油酸钠和水混合搅拌25～35min，并冷却至25℃以下后，在30～35℃水浴条件下，加入5mmol/L的AgNO₃溶液并搅拌4～6min，然后静置10～20min后，加入0.01mol/L的氯金酸溶液，搅拌直至溶液由亮黄色变为澄清后，加入质量分数为37.5％的浓HCl溶液，继续搅拌15～25min，然后加入0.1mmol/L的抗坏血酸溶液并搅拌1～3min，再加入晶种溶液，继续搅拌1～3min后放置8～12h，即得混合液A；

其中，十六烷基三甲基溴化铵、油酸钠、水、AgNO₃溶液、氯金酸溶液、浓HCl溶液、抗坏血酸溶液、步骤S1制备的晶种溶液的质量体积比为7～7.5g:1.23～1.27g:475～485ml:14～15ml:23～26mL:1.2～1.8ml:0.6～1mL:0.3～0.5mL；

c具体为：将混合液A与质量分数为0.5wt％的壳聚糖溶液按体积比为1:1混合，超声处理混匀，超声频率为100kHz，超声时间为5～15min，然后在转速为5000rpm下离心10～15min，离心2～3次，取沉淀，以5～8mg:1ml的质量体积比将沉淀分散于水中并超声处理，超声频率为100kHz，超声时间为5～15min，得微溶液，取5～8mL该微溶液滴定于玻碳电极表面，晾干即得壳聚糖功能化的金纳米修饰玻碳电极。

3.如权利要求1所述的用壳聚糖功能化的金纳米修饰玻碳电极检测酪氨酸的方法，其特征在于，步骤二中酪氨酸的差分脉冲伏安曲线的获得具体为：Z1、采用所述工作电极搭建三电极体系，利用差分脉冲伏安法，分别测量并记录多份含有不同浓度的酪氨酸的PBS缓冲溶液的差分脉冲伏安曲线，在此过程中记录每份含酪氨酸的PBS缓冲溶液的电流强度峰值；

其中，以步骤Z1得到的每份含酪氨酸的PBS缓冲溶液的电流强度峰值与不含酪氨酸的PBS缓冲溶液的电流强度峰值的差值作为纵坐标，以每份酪氨酸的浓度为横坐标，绘制标准曲线并计算线性方程。