[发明专利]组织芯片的多重染色方法有效
| 申请号： | 201710424207.5 | 申请日： | 2017-06-07 |
| 公开（公告）号： | CN108956241B | 公开（公告）日： | 2021-04-30 |
| 发明（设计）人： | 王筠;盛司潼;李延鹏;鈡姗;谭辉彪;朱民 | 申请（专利权）人： | 深圳大学;深圳华因康基因科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N1/30 | 分类号： | G01N1/30;G01N1/31;G01N33/535 |
| 代理公司： | 北京远智汇知识产权代理有限公司 11659 | 代理人： | 张海英 |
| 地址： | 518000 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 组织 芯片 多重 染色 方法 | ||
1.一种组织芯片的多重染色方法包括：依次对同一组织芯片的多种蛋白质/抗原进行免疫组化染色，其特征在于，在每次免疫组化染色过程中使用柠康酸酐水溶液作为抗原修复液对组织芯片进行抗原修复；
所述抗原修复采用封装水浴法进行，具体步骤为：
封装组织芯片上的组织切片，所述封装定义具有渗水结构的收容空间；
将封装后的组织芯片在具有预设温度的抗原修复液中对组织切片进行预定时间的水浴加热；以及
冷却组织切片；
所述封装的结构包括：
固定有组织切片的组织芯片；
朝向组织切片并且和组织芯片间隔设置的玻片；以及
环绕组织切片设在组织芯片和玻片之间的间隔层，所述组织芯片、玻片和间隔层共同定义具有渗水结构的收容空间。
2.根据权利要求1所述的组织芯片多重染色方法，其特征在于，在对组织切片进行水浴加热前，将封装后的组织芯片放入室温抗原修复液中，使抗原修复液渗透至收容空间中对组织切片进行预处理。
3.根据权利要求1所述的抗原修复方法，其特征在于，所述预设温度为95-100℃，所述预定时间为15-30分钟。
4.根据权利要求1所述的组织芯片多重染色方法，其特征在于，在冷却组织切片后进一步包括去除对组织芯片上的组织切片的封装。
5.根据权利要求1所述的组织芯片多重染色方法，其特征在于，所述间隔层为单层或多层滤纸。
6.一种组织芯片的多重染色方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：依次对同一组织芯片进行RNA原位杂交、免疫组化染色和DNA原位杂交；
在所述RNA原位杂交、免疫组化染色和DNA原位杂交过程中，使用柠康酸酐水溶液作为抗原修复液对组织芯片进行抗原修复；
所述抗原修复采用封装水浴法进行，具体步骤为：
封装组织芯片上的组织切片，所述封装定义具有渗水结构的收容空间；
将封装后的组织芯片在具有预设温度的抗原修复液中对组织切片进行预定时间的水浴加热；以及
冷却组织切片；
所述封装的结构包括：
固定有组织切片的组织芯片；
朝向组织切片并且和组织芯片间隔设置的玻片；以及
环绕组织切片设在组织芯片和玻片之间的间隔层，所述组织芯片、玻片和间隔层共同定义具有渗水结构的收容空间。
7.根据权利要求6所述的组织芯片的多重染色方法，其特征在于，所述预设温度为95-100℃，所述预定时间为15-30分钟。
8.根据权利要求6所述的组织芯片的多重染色方法，其特征在于，所述间隔层为单层或多层滤纸。
9.根据权利要求6所述的组织芯片的多重染色方法，其特征在于，所述免疫组化染色步骤包括对多种蛋白质/抗原依次进行免疫组化染色。
10.根据权利要求9所述的组织芯片的多重染色方法，其特征在于，在所述对多种蛋白质/抗原依次进行免疫组化染色过程中采用AEC显色液进行显色。
11.根据权利要求6所述的组织芯片的多重染色方法，其特征在于，所述DNA原位杂交为TUNEL原位杂交。
12.根据权利要求6所述的组织芯片的多重染色方法，其特征在于，对组织芯片采用环保型生物制片透明剂进行脱蜡。
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