[发明专利]快速检测酪氨酸浓度的方法

说明书

本发明公开了一种快速检测酪氨酸浓度的方法，包括以下步骤：步骤一、以玻碳电极为工作电极搭建三电极体系，用差分脉冲伏安法分别测量并记录多份含有不同浓度的酪氨酸的PBS缓冲溶液的差分脉冲伏安曲线，并记录对应的电压强度峰值；步骤二、以每份含酪氨酸的缓冲PBS冲溶液的电压强度峰值与不含酪氨酸的PBS缓冲溶液的电压强度峰值的差值为纵坐标，以每份酪氨酸的浓度为横坐标，绘制标准曲线并计算线性方程；步骤三、采用步骤一的方法得到待测溶液的电压强度峰值，代入线性方程得待测溶液的酪氨酸浓度。本发明具有操作简单、检测快速且灵敏度高的优点，能进行混合样品溶液中酪氨酸的高灵敏识别。

技术领域

本发明涉及酪氨酸浓度检测领域。更具体地说，本发明涉及一种快速检测酪氨酸浓度的方法。

背景技术

酪氨酸(Tyrosine，Tyr)属于芳香族氧基酸，在体内可由苯丙氨酸经化而来，是人体重要的半必需氨基酸。酪氨酸的代谢斎乱可导致多种遗传性疾病的发生，如酪氨酸血症、尿黑酸症等，而且与肝肾疾病、神经系统变性性疾病、恶性肿瘤等有一定的相关性。酪氨酸是人体不可缺少的一种氨基酸，它是合成神经递质儿茶酚胺的前体，缺乏酪氨酸人体就会出现生长异常，智能低下等现象，因此国内外已普遍开始重视食品中酪氨酸含量的添加。研究发现，酪氨酸及其代谢产物的含量在健康人和遗传性疾病、肝肾疾病以及恶性肿瘤等疾病患者体液中有明显差异。因此，探索酪氨酸及其代谢产物含量的分析新技术并应用于实际样品测定，对某些疾病的诊断、治疗和监测具有十分重要的临床意义。测定酪氨酸的方法主要有氨基酸自动分析仪、分光光度法、高效液相色谱法、质谱法、核磁共振波谱法和毛细管电泳法等,这些技术虽然应用比较广泛，但使用的仪器昂贵、前处理复杂费时、试剂消耗量大且分析时间较长，混合样品检测不灵敏的缺陷，检测限高，不能满足现场快速检测的需求。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种操作简单、检测快速且灵敏度高，能进行混合样品溶液中酪氨酸的高灵敏识别。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种快速检测酪氨酸浓度的方法，包括以下步骤：

步骤一、采用玻碳电极作为工作电极搭建三电极体系，利用差分脉冲伏安法，分别测量并记录多份含有不同浓度的酪氨酸的PBS缓冲溶液的差分脉冲伏安曲线，在此过程中记录每份含酪氨酸的PBS缓冲溶液的电压强度峰值；

步骤二、以步骤一得到的每份含酪氨酸的缓冲PBS冲溶液的电压强度峰值与不含酪氨酸的PBS缓冲溶液的电压强度峰值的差值作为纵坐标，以每份酪氨酸的浓度为横坐标，绘制标准曲线并计算线性方程；

步骤三、以玻碳电极作为工作电极，使用三电极体系差分脉冲伏安法测量并记录待测溶液的差分脉冲伏安曲线，得到待测溶液的电压强度峰值，代入所述线性方程得到待测溶液的酪氨酸浓度。

优选的是，步骤一中配制的多份含有不同浓度的酪氨酸的PBS缓冲溶液，PBS缓冲溶液的pH均为7.4，其浓度均为0.1mol/L，酪氨酸浓度依次为5.0×10^-6mol/L、1×10^-5mol/L、2.5×10^-5mol/L、4.5×10^-5mol/L、7×10^-5mol/L、1×10^-4mol/L、1.5×10^-4mol/L、2×10^-4mol/L、3×10^-4mol/L。

优选的是，所述玻碳电极经过打磨处理，具体为：将玻碳电极先用紫薯粉水溶液浸泡20～30min，取出玻碳电极用大豆磷脂的四氯化碳溶液浸泡20～30min，再依次用质量分数为95％的乙醇水溶液、二次蒸馏水分别超声清洗5～10min，然后依次用粒径为0.3μm、0.05μm的氧化铝粉末打磨，再用质量分数为95％的乙醇水溶液、二次蒸馏水分别超声清洗5～10min，最后用氮气吹干即可；