[发明专利]一种康宁木霉菌剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物菌剂及其制备方法和应用，具体涉及一种康宁木霉菌剂及其制备方法和应用，属于农业微生物技术领域。

背景技术

土传病害发病规律复杂、传播蔓延快、危害严重，产量损失较大，常造成土壤生态环境恶化，可周年发生。

土传病害也是引起连作障碍最主要原因之一，作物连作为病原菌的大量繁殖提供了有利场所，加重了土传病害的发生。

土传病害种类较多，常见的有十字花科菌核病、软腐病，茄果、瓜类等猝倒病、立枯病、疫病、根腐病、枯萎病和黄萎病，番茄、黄瓜和甜辣椒青枯病、根结线虫病等。

近年来，由于连作面积的不断扩大、用药不科学、生产中作物种植种类单一、高密度连作栽培以及缺乏有效轮作等栽培措施的影响，致使土传病害发展蔓延速度较快，抗性增强，作物死苗率不断增加，从而造成作物严重减产，甚至绝产，品质降低，已经严重影响了农作物生产。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种操作简单、定植力强、不会产生抗药性、能够有效防治土传病害的康宁木霉菌剂及其制备方法。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种康宁木霉菌剂，其特征在于，包括：康宁木霉菌粉、氨基酸和黄腐酸钾，其中，前述康宁木霉菌粉由保藏编号为CGMCC No.13771(拉丁文名称为Trichoderma koningii)的康宁木霉在麦麸培养基上发酵得到。

前述的康宁木霉菌剂，其特征在于，在前述康宁木霉菌粉中，康宁木霉的孢子含量≥100亿/克。

前述的康宁木霉菌剂，其特征在于，前述康宁木霉菌粉、氨基酸和黄腐酸钾按照5：1-3：0.5-1.5的质量比例混合。

前述的康宁木霉菌剂，其特征在于，前述康宁木霉菌粉、氨基酸和黄腐酸钾按照5：2：1的质量比例混合。

前述的康宁木霉菌剂，其特征在于，制备方法如下：

Step1：将保藏编号为CGMCC No.13771的康宁木霉接种在PDA平板培养基上，25-28℃暗培养5-10d，将培养好的平板作为原种；

Step2：将Step1培养好的原种接种在PDA液体培养基上，25-28℃、121rpm暗培养3-5d，将发酵好的液体作为种子液；

Step3：将麦麸与水按照70：25-35的质量比混匀，灭菌后作为发酵培养基；

Step4：将Step2培养好的种子液加入到Step3制得的发酵培养基中，25-28℃静置暗培养，待孢子含量≥200亿/克时停止发酵；

Step5：将Step4制得的发酵液烘干，粉碎，过筛，得到孢子含量≥100亿/克的康宁木霉菌粉；

Step6：将Step5制得的康宁木霉菌粉与氨基酸和黄腐酸钾混合。

本发明的有益之处在于：

(1)康宁木霉可以快速生长进行生态位占据，同时产生多种次生代谢产物抑制病原菌生长，经试验验证，本发明的康宁木霉菌剂可以有效防治草莓根腐病、黄瓜蔓枯病等土传病害，具有非常积极的使用效果；

(2)本发明的康宁木霉菌剂，孢子含量较高，可以减少亩用量，节约成本；

(3)本发明的康宁木霉菌剂，可滴灌、可冲施、可与底肥混合使用，使用方法多样，可根据不同情况合理使用，节约人力及使用成本；

(4)本发明的康宁木霉菌剂，可以产生多种次生代谢产物，从而可以改良土壤，促进植物生长；

(5)本发明的康宁木霉菌剂，其工艺简单，适合工厂化生产。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作具体的介绍。

第一部分：获取康宁木霉

1、筛选分离菌株

将从大棚采集的土样在PDA平板上进行稀释分离培养，挑取生长较快的菌落。

2、鉴定菌株

利用ITS序列进行分子检测，检测结果显示分离得到的菌株为康宁木霉。

3、菌株保藏

我们将筛选分离得到的康宁木霉于2017年03月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为CGMCC No.13771。

第二部分：制备康宁木霉菌剂

1、培养原种

将保藏编号为CGMCC No.13771的康宁木霉接种在PDA平板培养基上，27℃暗培养7d，将培养好的平板作为原种。

2、培养种子液