[发明专利]用于检测8-OHdG的适配体功能化磁纳米材料及其应用有效

专利信息
申请号: 201710431925.5 申请日: 2017-06-09
公开(公告)号: CN107271583B 公开(公告)日: 2020-04-28
发明(设计)人: 廖且根;李耘;张大文;王天琪;吴静 申请(专利权)人: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所;江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/14;G01N33/543;B82Y15/00;B82Y25/00;B82Y30/00
代理公司: 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 代理人: 李进
地址: 100000 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 用于 检测 ohdg 适配体 功能 纳米 材料 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种基于适配体功能化磁纳米材料的检测8-OHdG的方法,其特征在于,包括:

将所述适配体功能化磁纳米材料加入到待检尿液样品的溶液中,室温孵育使其充分结合后用磁铁分离并洗脱得到洗脱液;通过液相色谱-串联质谱技术对洗脱液进行检测;

所述适配体功能化磁纳米材料由生物素化8-OHdG适配体修饰到磁纳米颗粒表面得到;

所述8-OHdG适配体的序列如SEQ ID NO:1所示;

所述磁纳米颗粒是通过戊二醛交联作用在氨基化三氧化二铁表面修饰醛基,再将亲和素修饰到磁纳米表面得到;

洗脱时所用的溶剂为甲醇;洗脱温度为58℃~62℃,洗脱时间为50min~70min;

液相色谱的流动相为0.08%~0.12%v/v甲酸甲醇溶液;液相色谱的洗脱方式为梯度洗脱;流速为0.2~0.4mL/min;

质谱条件为正离子模式下多反应检测,检测离子对分别为m/z 284.1140和m/z 284.1168。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述生物素化8-OHdG适配体修饰到磁纳米颗粒表面的过程具体包括:

将所述磁纳米颗粒于PBS中超声分散,加入生物素化8-OHdG适配体单链并孵育,磁分离后,清洗除去未与所述磁纳米颗粒连接的单链。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在通过液相色谱-串联质谱技术对洗脱液进行检测之前还包括:将所述洗脱液吹至近干并用水重悬。

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