[发明专利]一种梭子蟹肌孢虫的染色方法在审

专利信息
申请号: 201710432514.8 申请日: 2017-06-09
公开(公告)号: CN107271245A 公开(公告)日: 2017-10-20
发明(设计)人: 王元;房文红;周俊芳;李新苍;赵姝;常晓晴 申请(专利权)人: 中国水产科学研究院东海水产研究所
主分类号: G01N1/30 分类号: G01N1/30
代理公司: 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司31227 代理人: 曹莉
地址: 200090 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 梭子蟹 肌孢虫 染色 方法
【权利要求书】:

1.一种梭子蟹肌孢虫的染色方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1.取梭子蟹肌肉组织,用Davidson’s AFA固定液固定;

S2.制作组织石蜡包埋块;

S3.二甲苯脱蜡2次;

S4.乙醇梯度水化:100%乙醇2-4min,100%乙醇2-4min,95%乙醇2-4min,85%乙醇2-4min,75%乙醇2-4min,50%乙醇2-4min,蒸馏水洗2-4min;所述乙醇浓度均为体积百分比;

S5.Weigert氏铁苏木素染液染色4-6min,水洗,1%的盐酸酒精分化,流水冲洗返蓝;所述1%的盐酸酒精是用质量分数为37%的盐酸与体积分数为70%的乙醇按体积1:99混合而成;

S6.丽春红酸性品红液染色6-8min,水漂洗,磷钼酸水溶液分化3-5min;

S7.苯胺蓝液复染4-6min,体积百分比为1%的冰醋酸水溶液分化1min;

S8.用95%体积百分比的乙醇和100%乙醇分别脱水,二甲苯透明,晾干。

2.根据权利要求1中所述的梭子蟹肌孢虫的染色方法,其特征在于,步骤S5中所述Weigert氏苏木素染液包括溶液A和溶液B;染色时,将溶液A和溶液B等体积混合;

所述溶液A的制备方法为将苏木精按0.8~1.2g:100ml的比例溶解于体积百分比为95%酒精;

所述溶液B的制备方法为取质量百分比为29%三氯化铁溶液加入到蒸馏水中后,再加入浓盐酸,所述三氯化铁溶液、水和浓盐酸的体积比为4:95:1;所述浓盐酸的质量百分比为37%。

3.根据权利要求1中所述的梭子蟹肌孢虫的染色方法,其特征在于,步骤S6中所述丽春红酸性品红染液由丽春红、酸性品红、水与冰醋酸按0.7g:0.3g:99ml:1ml配制而成。

4.根据权利要求1中所述的梭子蟹肌孢虫的染色方法,其特征在于,步骤S6中所述磷钼酸水溶液的质量百分比为1%。

5.根据权利要求1中所述的梭子蟹肌孢虫的染色方法,其特征在于,步骤S7中所述苯胺蓝液由苯胺蓝、水与冰醋酸按2g:98ml:2ml配制而成。

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