[发明专利]一种梭子蟹肌孢虫的染色方法在审
申请号: | 201710432514.8 | 申请日: | 2017-06-09 |
公开(公告)号: | CN107271245A | 公开(公告)日: | 2017-10-20 |
发明(设计)人: | 王元;房文红;周俊芳;李新苍;赵姝;常晓晴 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30 |
代理公司: | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司31227 | 代理人: | 曹莉 |
地址: | 200090 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 梭子蟹 肌孢虫 染色 方法 | ||
1.一种梭子蟹肌孢虫的染色方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.取梭子蟹肌肉组织,用Davidson’s AFA固定液固定;
S2.制作组织石蜡包埋块;
S3.二甲苯脱蜡2次;
S4.乙醇梯度水化:100%乙醇2-4min,100%乙醇2-4min,95%乙醇2-4min,85%乙醇2-4min,75%乙醇2-4min,50%乙醇2-4min,蒸馏水洗2-4min;所述乙醇浓度均为体积百分比;
S5.Weigert氏铁苏木素染液染色4-6min,水洗,1%的盐酸酒精分化,流水冲洗返蓝;所述1%的盐酸酒精是用质量分数为37%的盐酸与体积分数为70%的乙醇按体积1:99混合而成;
S6.丽春红酸性品红液染色6-8min,水漂洗,磷钼酸水溶液分化3-5min;
S7.苯胺蓝液复染4-6min,体积百分比为1%的冰醋酸水溶液分化1min;
S8.用95%体积百分比的乙醇和100%乙醇分别脱水,二甲苯透明,晾干。
2.根据权利要求1中所述的梭子蟹肌孢虫的染色方法,其特征在于,步骤S5中所述Weigert氏苏木素染液包括溶液A和溶液B;染色时,将溶液A和溶液B等体积混合;
所述溶液A的制备方法为将苏木精按0.8~1.2g:100ml的比例溶解于体积百分比为95%酒精;
所述溶液B的制备方法为取质量百分比为29%三氯化铁溶液加入到蒸馏水中后,再加入浓盐酸,所述三氯化铁溶液、水和浓盐酸的体积比为4:95:1;所述浓盐酸的质量百分比为37%。
3.根据权利要求1中所述的梭子蟹肌孢虫的染色方法,其特征在于,步骤S6中所述丽春红酸性品红染液由丽春红、酸性品红、水与冰醋酸按0.7g:0.3g:99ml:1ml配制而成。
4.根据权利要求1中所述的梭子蟹肌孢虫的染色方法,其特征在于,步骤S6中所述磷钼酸水溶液的质量百分比为1%。
5.根据权利要求1中所述的梭子蟹肌孢虫的染色方法,其特征在于,步骤S7中所述苯胺蓝液由苯胺蓝、水与冰醋酸按2g:98ml:2ml配制而成。
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