[发明专利]粪便菌群移植技术及其应用

说明书

本发明公开了一种粪便菌群移植方法，包括以下步骤：1)、粪便的采集及筛选条件：被采集新鲜粪便的猪需同时满足以下两个条件：a、至采集日为止的2‑3个月内没有发生腹泻且没有使用抗生素；b、采集日经粪便检测无猪瘟等疾病的病原；2)、粪菌悬液的制备：将所采集的新鲜粪便加入甘油水混液中，均匀搅拌后形成悬浮液，静置，取上清，得粪菌悬液；3)、粪便菌群移植：将新鲜配制的粪菌悬液或者解冻后的冻存粪菌悬液对三元或二元杂交受体仔猪进行粪便菌群移植。本发明能用于仔猪养殖，改善仔猪肠道形态，降低腹泻，缓解断奶应激，从而提高其生长性能。

技术领域

本发明涉及一种粪便菌群移植技术及其在仔猪养殖中的应用。

背景技术

仔猪消化系统和免疫系统发育不完善，容易因营养因素、环境应激、感染细菌病毒等引发腹泻。仔猪腹泻无论在散养户，还是规模化、集约化养猪场均普遍存在。腹泻可导致仔猪生长缓慢、体质变弱，甚至死亡，给猪场造成严重的经济损失。

目前针对仔猪腹泻的治疗方法主要是使用抗生素，但长期使用抗生素容易产生耐药性，造成病程延长，治疗费用增加，导致其他并发症等。

动物的胃肠道中栖居着大量微生物，其数量高达10万亿个，1000多种。在长期进化过程中，肠道菌群与宿主形成了互惠共生的关系，它不仅随宿主生长而变化，还影响宿主健康。肠道菌群凭借其强大的代谢和调控能力，又被称为“超级生物体”。当肠道菌群紊乱时，不仅会使胃肠道机能受损，也会影响动物机体各方面功能。作为机体不可或缺的一部分，肠道菌群被认为更像是宿主的一个重要器官。大量研究表明，动物腹泻时，肠道菌群失调，有益菌急剧降低，有害菌急剧增多。且抗生素可造成肠道菌群严重失调，导致腹泻治愈率降低。

粪便菌群移植是将健康个体粪便中的功能菌群，移植到受体胃肠道内，重建具有正常功能的菌群，达到治疗疾病的目的。国内外研究表明粪便菌群移植对难辨梭状芽孢杆菌感染、溃疡性结肠炎、克罗恩病等，有明显疗效。粪菌移植在治疗人类患者肠道疾病时，粪便主要采集于健康亲属或无血缘关系的健康者，是在同种人不同个体之间进行粪菌移植。

目前，还未见运用粪便菌群移植方法用于仔猪养殖的报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种粪便菌群移植技术及其在仔猪养殖中的应用。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种粪便菌群移植方法，包括以下步骤：

1)、粪便的采集及筛选条件：

采集猪的新鲜粪便(备用)，被采集新鲜粪便的猪需同时满足以下两个条件：

a)、至采集日为止的2-3个月内没有发生腹泻且没有使用抗生素；

b)、采集日经粪便检测无以下疾病的病原：猪瘟、猪圆环病毒2型感染、蓝耳病、伪狂犬、猪丹毒、猪支原体肺炎、口蹄疫等；

2)、粪菌悬液的制备：

先将无菌生理盐水与甘油混合，得甘油水混液；所述甘油水混液中甘油的体积浓度为8％～15％；

然后按照1g:10～50ml的料液比，将所采集的新鲜粪便加入甘油水混液中，均匀搅拌后形成悬浮液，所述悬浮液静置0.5～5min，取上清，所述上清为粪菌悬液；

将粪菌悬液直接用于下述步骤3)，或者将粪菌悬液分装于无菌离心管，-80℃保存；

3)、粪便菌群移植：

将新鲜配制的粪菌悬液或者解冻后的冻存粪菌悬液对三元或二元杂交受体仔猪进行粪便菌群移植；

所述粪便菌群移植方式为：口灌服、灌肠、或者借助鼻胃管、内窥镜等插入上消化道。

灌服时，一般为新生仔猪于1～20天(例如为1～12d、1～15d、7～20d)隔天灌服1～3ml的粪菌悬液。