[发明专利]一种丹参酮ⅡA磺酸钠注射液的含量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种药物含量检测方法，尤其是一种丹参酮ⅡA磺酸钠注射液的含量检测方法。

背景技术

丹参酮ⅡA磺酸钠注射液是中国于20世纪60年代自主研发的中药注射制剂,由丹参酮ⅡA磺酸钠和辅料葡萄糖溶于注射用水中形成，临床上用于冠心病、心绞痛、心肌梗死的辅助治疗。丹参酮ⅡA磺酸钠是丹参酮ⅡA经过磺化而成的,其水溶性好,临床起效快,能增加冠脉流量，能改善缺血区心肌的侧枝循环及局部供血,改善缺氧心肌的代谢紊乱,提高心肌耐氧能力,抑制血小板聚集及抗血栓形成,缩小缺血心肌梗死面积,在一定剂量下还能增强心肌收缩力。丹参酮ⅡA磺酸钠注射液原质量标准为地方标准,现国家食品药品监督管理局将其上升为国家标准,标准中含量测定方法为分光光度法，尽管该方法具有许多优点，但仍然在以下缺陷：1、专属性较差：；2、忽略了对辅料葡萄糖的分析和测定。

定量质子核磁共振(quantitative proton nuclear magnetic resonance,q¹H-NMR)技术是一种日趋成熟的定量分析方法，现已在药物、化学、食品、农业以及军事领域有广泛的应用，可检测标准物质的纯度，也可测定混合物中各种成分的含量，且定量核磁共振技术q¹H-NMR于2010年收载在我国药典附录中。q¹H-NMR用于药物分析的最大优势在于可同时提供化合物结构确证的定性信息和含量测定的定量信息。与HPLC方法相比，该方法具有对样品无破坏、操作简便、所得结果重现性好、准确度高等优点。q¹H-NMR常用定量方法为绝对定量法，即以含量已知的内标物与待测物制成混合溶液同时测定图谱，通过二者峰面积的比值确定待测物的含量。在对混合物中的成分进行定量分析时，其关键在于定量峰的选择，选择各个成分中完全独立、无干扰的特征信号峰才可用于该化合物的含量测定。

本发明同时对丹参酮ⅡA磺酸钠注射液中的有效成分丹参酮ⅡA磺酸钠和辅料葡萄糖进行定性定量分析，对注射剂质量控制方面具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种丹参酮ⅡA磺酸钠注射液的含量检测方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种丹参酮ⅡA磺酸钠注射液的含量检测方法，基于核磁共振法(¹H-NMR)对丹参酮ⅡA磺酸钠注射液中的丹参酮ⅡA磺酸钠和葡萄糖同时进行含量测定，具体步骤为：

(1)内标溶液的配制

称取内标物TSP(3-三甲基硅基丙酸钠-d₄)溶解于容量瓶中，用D₂O(重水)溶解并定容至刻度线；

(2)供试品溶液的制备

精密移取丹参酮ⅡA磺酸钠注射液样品并加入上述内标溶液溶解，其中，每0.4ml丹参酮ⅡA磺酸钠注射液样品加入0.1ml内标溶液，得供试品溶液，将所述供试品溶液转移至5mm核磁管中，直接用于¹H-NMR测试；

(3)¹H-NMR指纹图谱的测定

将核磁管置于核磁共振仪中，采用水峰抑制脉冲序列测定丹参酮ⅡA磺酸钠注射液样品溶液的¹H-NMR图谱，其中测试参数及条件为：抑水峰序列zgcppr，观测频率400.13MHz，测定温度300K，谱宽8223.7Hz，90°脉冲宽度15μs，采样数据点65536，扫描次数16次，延迟时间7s，接受增益128；

(4)样品¹H-NMR图谱分析

依据¹H-NMR图谱及文献数据，鉴定丹参酮ⅡA磺酸钠和葡萄糖，采用MestReNova软件对得到的¹H-NMR图谱依次进行相位调整、基线校正、定标，并对其质子峰信号进行归属；

(5)¹H-NMR成分的含量测定

在上述实验条件下采集图谱，以3-(三甲基甲硅烷基)丙酸-d₄钠盐(TSP)为内标化合物，对丹参酮ⅡA磺酸钠和葡萄糖以及内标物TSP的定量峰分别进行积分，按照¹H-NMR内标法根据积分结果依照以下公式计算丹参酮ⅡA磺酸钠和葡萄糖的浓度：