[发明专利]一种医用临床免疫分析用的分子印迹聚合物微球的制备方法

权利要求书

1.一种医用临床免疫分析用的分子印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于，以氯甲基聚苯乙烯球为载体，在其表面修饰引发转移终止剂二乙基二硫代氨基甲酸钠，以三氯生为模板分子，4-乙烯吡啶为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，采用光引发聚合制备三氯生分子印迹聚合物微球；

具体包括以下步骤：

S1、引发转移终止剂二乙基二硫代氨基甲酸钠修饰聚苯乙烯球：

将氯甲基聚苯乙烯球载体超声分散于乙醇中，缓慢滴加二乙基二硫代氨基甲酸钠乙醇溶液，反应后将所得产物进行清洗，真空干燥，得到表面接枝修饰的聚苯乙烯球；

S2、光引发聚合制备三氯生分子印迹聚合物微球：

1)将三氯生、4-乙烯吡啶、乙二醇二甲基丙烯酸酯充分溶解于磷酸缓冲溶液中，预聚10-12小时；

2)将上述的预聚反应物中加入S1中制备好的二乙基二硫代氨基甲酸钠修饰的聚苯乙烯微球，经超声脱气后密封，在室温下以紫外光照聚合10-12小时，制备得到的产物经除去模板分子及未反应的试剂，然后加入聚苯乙烯微球、交联剂、引发剂和分散介质，使其发生聚合反应得到聚合物微球；

S3、以4-氯甲基苯基三氯硅烷对聚合物微球进行表面改性，得到-Cl修饰的聚合物微球；

S4、聚合物微球表面功能化：

将聚合物微球分散于醋酸水溶液中，加入KH550，于50-70℃下反应4-6h，磁分离产物，用蒸馏水洗涤，得表面功能化的磁性复合微球；

S5、分子印迹聚合物微球的制备：

取α-甲基丙烯酸溶于乙醇中，室温下振荡，使物料溶解完全，然后加入乙二醇二甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈和表面功能化的磁性复合微球，氮气保护，机械搅拌于50-70℃水浴反应10-30h；反应结束后，磁分离产物，洗涤，干燥，即得分子印迹聚合物微球。

2.根据权利要求1所述的一种医用临床免疫分析用的分子印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于，步骤S1中反应条件为反应温度35-45℃，反应时间6-10小时；采用乙醇和丙酮分别多次清洗产物，在40-45℃下真空干燥6-10小时。

3.根据权利要求1所述的一种医用临床免疫分析用的分子印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于，步骤S2中超声脱气条件为35-40℃下10-20min。

4.根据权利要求1所述的一种医用临床免疫分析用的分子印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于，步骤S2中脱除模板分子及未反应的试剂的方法为采用10v：v％的乙酸、10wt：wt％十二烷基硫酸钠和pH为5.4的0.01mol/L磷酸缓冲溶液反复振荡洗涤，在40-45℃下真空干燥6-10小时。

5.根据权利要求1所述的一种医用临床免疫分析用的分子印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于，步骤S2中交联剂为聚三甲基丙烯酸丙三醇酯，引发剂为偶氮二异丁腈，分散介质为水。

6.根据权利要求1所述的一种医用临床免疫分析用的分子印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于，步骤S2中的聚合反应是在索氏提取器中进行的。

7.根据权利要求1所述的一种医用临床免疫分析用的分子印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于，步骤S3中4-氯甲基苯基三氯硅烷的制备方法为：将4-氯甲基苯基三氯硅烷溶解于无水二甲基甲酰胺中，加入过量NaH，磁力搅拌0.5-1.5h后过滤除去过量的NaH；在磁力搅拌下逐滴加入γ-丙基三甲氧基硅烷，在80℃下反应10-14h；反应结束，洗涤沉淀物后真空干燥10-14h。

8.根据权利要求1所述的一种医用临床免疫分析用的分子印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于，步骤S4中醋酸水溶液的质量浓度为8-15％。

9.根据权利要求1所述的一种医用临床免疫分析用的分子印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于，步骤S5中α-甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈的摩尔比为2：7：0.3。

10.根据权利要求1所述的一种医用临床免疫分析用的分子印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于，步骤S5中水浴反应为密闭反应。