[发明专利]一种预防及治疗肿瘤的基因疫苗及其制备方法和用途有效
申请号: | 201710450454.2 | 申请日: | 2017-06-15 |
公开(公告)号: | CN107281475B | 公开(公告)日: | 2020-12-25 |
发明(设计)人: | 尚云龙;曹王丽;罗伊·杜曼尼;杨军;方玲;胡江宁;王如伟;陈哲浩;吴华铃;吴永江 | 申请(专利权)人: | 杭州贝罗康生物技术有限公司 |
主分类号: | A61K39/00 | 分类号: | A61K39/00;A61K39/39;A61P35/00;C12N15/85 |
代理公司: | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人: | 黎双华 |
地址: | 310052 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 预防 治疗 肿瘤 基因 疫苗 及其 制备 方法 用途 | ||
本发明公开了一种预防及治疗肿瘤的基因疫苗,所述基因疫苗包括同时携带人AFP基因、人IgG1 Fc片段基因和人CSF2基因的重组基因真核表达载体。该基因疫苗可用于肝癌等疾病的基因免疫治疗及预防,既能发挥细胞因子的免疫调节作用,又能靶向针对肝癌等疾病产生特异性免疫反应,采用双基因共表达的策略还减少了疫苗的组分数量。试验结果表明疫苗能够在体外人源细胞系中正常表达目的基因,并在体外条件下能够显著抑制肝癌细胞的分裂增殖。
技术领域
本发明涉及一种基因疫苗,特别是涉及一种可激活特定机体免疫反应并具有预防及治疗肝癌等癌症效果的基因疫苗的设计、制备方法及其应用。
背景技术
基因疫苗是上个世纪90年代初出现的一种新型疫苗,是指采用能够表达特定抗原的基因本身制备的疫苗形式,目前的基因疫苗主要是含有抗原基因的真核表达质粒DNA。基因疫苗自出现以来已经获得了快速而长足的发展,其应用从传染性和预防性疫苗拓展到了非传染性疾病和治疗性疫苗领域,包括糖尿病和肿瘤治疗等。与传统的疫苗相比,基因疫苗能够工业化大规模生产,具有疫苗纯度较高、易于制备且相对安全、稳定性好、免疫效果好、成本低廉、储存方便等诸多优点。因此,基因疫苗研究正在受到越来越多的关注并取得了很大的进展,尤其是在肿瘤治疗领域。为了针对肿瘤激起更全面的免疫应答,研究人员在疫苗中引入了双基因或多基因串联表达技术,用一种疫苗表达两个或两个以上的肿瘤抗原,构建多价疫苗;或者同步表达肿瘤抗原和免疫刺激因子。多基因串联疫苗的设计既能够避免制备使用多个载体造成组分复杂、成本增加,又可以使表达产物在空间和时间上接近,从而发挥协同增效作用(阎瑾琦et al.,2008)。多基因串联设计大大拓展了DNA疫苗的设计空间。目前,多基因串联DNA疫苗中的基因主要有两种方式串联排布:一种是采用单一启动子,各基因之间通过内部核糖体进入位点序列(IRES)链接;第二种是每个基因都有自己的启动子,相对独立的表达各个基因。(Schirmbeck et al.,2000;楚素霞et al.,2011)。通过IRES序列介导的多基因串联相对多启动子串联结构能够大大减小表达载体的大小,而且还避免了多启动子之间的相互抑制作用,避免产生融合蛋白。
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