[发明专利]一种对四种人体体液来源进行鉴定的方法和系统

权利要求书

1.一种对四种人体体液来源进行鉴定的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）提取待鉴定的人体体液样本中的RNA，其中，所述人体体液样本的可能来源包括外周血、月经血、精液或唾液；

2）对所述RNA中的体液特异性miRNA进行逆转录，并对得到的逆转录产物进行扩增，获得相应的扩增结果，其中，所述体液特异性miRNA包括miRNA214、miRNA451、miRNA144、miRNA888、miRNA891和miRNA205，

同时，对内参基因进行逆转录，并对得到的内参逆转录产物进行扩增，获得内参扩增结果；

3）根据上述扩增结果和内参扩增结果，确定所述人体体液样本的来源；

在步骤2）中，采用与所述体液特异性miRNA一一对应的逆转录引物对其进行逆转录，分别得到相应的逆转录产物，其中，所述逆转录引物为序列表中SEQ ID No.1至SEQ ID No.6的核苷酸序列；

采用与所述逆转录产物一一对应的扩增引物对其进行扩增，并获得相应的Ct值，其中，所述扩增引物为序列表中SEQ ID No.7至SEQ ID No.18的核苷酸序列；

所述内参基因为RNU6b，采用序列表中SEQ ID No.20的核苷酸序列对所述内参基因进行逆转录，得到所述内参逆转录产物；

采用序列表中SEQ ID No.19和SEQ ID No.20的核苷酸序列对所述内参逆转录产物进行扩增，得到所述内参扩增结果；

其中，miRNA451和miRN144作为血液的特异性标记；miRNA214作为月经血的特异性标记；miRNA888和miRNA891作为精液特异性标记，miRNA205作为唾液特异性标记。

2.一种用于实施权利要求1所述的对四种人体体液来源进行鉴定的方法的检测体系，其特征在于，包括：待鉴定的人体体液样本中的RNA、内参基因、内参逆转录引物、内参扩增引物、逆转录引物和扩增引物，其中：

所述检测体系用于对所述RNA中的体液特异性miRNA进行逆转录，并对得到的逆转录产物进行扩增，获得相应的扩增结果，

所述检测体系还用于对内参基因进行逆转录，并对得到的内参逆转录产物进行扩增，获得内参扩增结果，

其中，所述体液特异性miRNA包括miRNA214、miRNA451、miRNA144、miRNA888、miRNA891和miRNA205；

所述逆转录引物与所述体液特异性miRNA一一对应，所述逆转录引物为序列表中SEQID No.1至SEQ ID No.6的核苷酸序列；

所述扩增引物与所述逆转录产物一一对应，所述扩增引物为序列表中SEQ ID No.7至SEQ ID No.18的核苷酸序列；

所述内参基因为RNU6b，所述内参逆转录引物为序列表中SEQ ID No.20的核苷酸序列，所述内参扩增引物为序列表中SEQ ID No.19和SEQ ID No.20的核苷酸序列。

3.一种检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求2所述的检测体系。