[发明专利]生产1，5-戊二胺的方法

权利要求书

1.一种生产1,5-戊二胺的方法，所述方法包括：

1)提供基因工程化的宿主细胞，所述细胞中含有赖氨酸脱羧酶基因以及L-阿拉伯糖或者D-木糖或者L-鼠李糖单糖调控元件，其中L-阿拉伯糖调控元件的序列为SEQ ID NO: 11，D-木糖调控元件包含序列为SEQ ID NO: 14的木糖启动子和序列为SEQ ID NO: 17的木糖调控蛋白编码基因及其核糖体结合位点，L-鼠李糖调控元件的序列为SEQ ID NO: 20；

2)在培养开始时或在培养过程中向培养基中加入相应的单糖，

其中，所述L-阿拉伯糖的浓度为0.16~0.2% w/v，所述D-木糖的浓度为0.16~0.2% w/v，所述L-鼠李糖的浓度为0.05~0.2% w/v。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，L-阿拉伯糖的浓度为0.16%或0.2% w/v。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，D-木糖的浓度为0.16%或0.2% w/v。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，L-鼠李糖的浓度为0.05%、0.1%、0.16%或0.2% w/v。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，所述宿主细胞是微生物、植物或动物细胞。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述微生物是大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)、蜂房哈夫尼菌(Hafnia alvei)或谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)。

7.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，赖氨酸脱羧酶基因来自微生物、动物或植物的细胞。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述微生物是大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌(Bacillus halodurans)、天蓝色链霉菌、蜂房哈夫尼菌、谷氨酸棒状杆菌或奥克西托克雷白杆菌(Klebsiella oxytoca)。

9.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，所述赖氨酸脱羧酶基因的序列为SEQID NO: 4的序列。

10.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，所述赖氨酸脱羧酶的氨基酸序列为SEQ ID NO: 3的序列。

11.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，赖氨酸脱羧酶基因序列上游的序列SEQ ID No: 24替换为SEQ ID No: 25。

12.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，赖氨酸脱羧酶基因和L-阿拉伯糖调控元件包含在载体pCIB61中，赖氨酸脱羧酶基因和D-木糖调控元件包含在载体pCIB63中，赖氨酸脱羧酶基因和L-鼠李糖调控元件包含在载体pCIB64中。

13.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，基因工程化的宿主细胞是大肠杆菌E. coli BL21菌株，赖氨酸脱羧酶基因和L-阿拉伯糖调控元件包含在载体pCIB61中，赖氨酸脱羧酶基因和D-木糖调控元件包含在载体pCIB63中，赖氨酸脱羧酶基因和L-鼠李糖调控元件包含在载体pCIB64中，并且L-阿拉伯糖的浓度为0.16%或0.2% w/v，D-木糖浓度是0.16%或0.2% w/v，L-鼠李糖的浓度是0.05%、0.1%、0.16%或0.2% w/v。