[发明专利]一种利用木质素降解菌强化废弃生物质碳酸钠预处理的方法

说明书

本发明公开了一种利用木质素降解菌强化废弃生物质碳酸钠预处理的方法，具体涉及在废弃生物质碳酸钠预处理的基础上，利用一种木质素降解菌(Cupriavidus basilensis B‑8，保藏编号CGMCC No.4240)以及通过改善培养条件进一步去除废弃生物质中的残余木质素和半纤维素，并将废弃生物质的稳固直杆状变得松散，表面呈现多孔片状，极大提高了酶解糖化时的可及表面。该方法可使碳酸钠预处理的酶解效率提高近40％，效果显著，兼具处理时间短、操作简单、二次污染小、成本低廉等优点。

技术领域：

本发明属于生物质新能源技术领域，具体涉及一种利用木质素降解菌强化废弃生物质碳酸钠预处理的方法。

背景技术：

近年来，为了降低对化石燃料的依赖，各国政府和科研机构大力开展对可再生能源的开发和研究。废弃生物质中的木质纤维素主要由纤维素、半纤维素和木质素组成，蕴藏着巨量的碳资源，成为第二代生物质能源，是当前生物乙醇、生物塑料、生物柴油等绿色产品生物发酵最重要的碳源。木质纤维素中的半纤维素和木质素紧密镶嵌在纤维素的周围，如不进行任何处理，其糖化发酵效率极低。因此，预处理成为了废弃生物质开发利用的首要环节，即疏松破坏纤维素的致密结构以及木质素和半纤维素的包裹，使纤维素、半纤维素和木质素分离，提高酶对纤维素的可及度和作用效率。

预处理主要有物理法、化学法和生物法。碳酸钠是一种强碱弱酸盐，近期被应用于废弃生物质预处理中(Reducing biomass recalcitrance via mild sodium carbonatepretreatment.Bioresource Technology.209(2016):386-390)。与氢氧化钠等传统碱法类似，碳酸钠预处理主要用于去除废弃生物质中的木质素和部分半纤维素。该方法具备了碱法预处理的诸多优势，同时可避免碱法的腐蚀、过度中和以及环境危害等问题。目前，已有人采用真菌法或真菌-化学联合预处理实现了废弃生物质中木质素的深度去除。但真菌生长所需时间过长(10～50天)，不利于工艺扩大化和商业化。与真菌相比，木质素降解细菌的数量虽然较少，但可大大缩短生物处理接种时间(7天)，因此采用细菌替代真菌进行废弃生物质预处理具有重要意义。目前，国内外目前尚无木质素降解细菌强化废弃生物质碳酸钠预处理的相关报道。

此外，废弃生物质秸秆也就是原生木质纤维素，不仅包括木质素，还包括纤维素和半纤维素，三者紧密结合连接；其中的原生木质素高度聚合，木质素降解细菌作用原生木质纤维素时比纯的碱木质素要更加复杂，作用难度更大，因此，找寻合适的培养基成分以及条件，最大程度的去除碳酸钠法预处理渣中残留木质素也是亟待解决的问题。

发明内容：

为了解决现有废弃生物质碳酸钠预处理技术存在的问题，本发明提供了一种利用木质素降解菌强化废弃生物质碳酸钠预处理的方法。

本发明的技术方案为：

一种利用木质素降解菌强化废弃生物质碳酸钠预处理的方法，包括以下步骤：

(1)碳酸钠预处理：将废弃生物质加入Na₂CO₃溶液中，加热反应后，过滤分离，所得固体清洗至pH呈中性，烘干，得到碳酸钠预处理废弃生物质；

(2)木质素降解菌强化预处理：将保藏编号为CGMCC No.4240的木质素降解菌Cupriavidus basilensis B-8接种于含碳酸钠预处理废弃生物质的无菌培养基中，培养后，过滤分离所得固体，清洗，烘干，得到细菌强化碳酸钠预处理的废弃生物质。

步骤(1)所述的废弃生物质包括：水稻秸秆，玉米秸秆，小麦秸秆，甘蔗渣或柳枝稷等。

步骤(1)将废弃生物质粉碎后20-100目过筛，超纯水清洗两遍，于60℃烘干至恒重。