[发明专利]一种大黄鱼干扰素调节因子IRF7启动子、核酸构建体、细胞及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种大黄鱼干扰素调节因子IRF7启动子、核酸构建体、载体，细胞及其制备方法和用途。所述大黄鱼干扰素调节因子IRF7启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，或者为与SEQ ID NO：1互补的核苷酸序列。本发明还保护了所述的启动子或核酸构建体或载体或重组细胞或含有启动子或核酸构建体或载体或重组细胞的鱼类或哺乳动物在调控目的基因表达或转基因鱼中的用途。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，特别是涉及一种大黄鱼干扰素调节因子IRF7启动子、核酸构建体、细胞及其制备方法和用途。

背景技术

干扰素调节因子(Interferon regulatory factor,IRF)家族是一类重要的转录因子，参与机体免疫应答、炎症反应、细胞凋亡等多种生物学功能的调节，尤其是在干扰素基因表达中起着重要的调节作用(Taniquchi T,Oqasawara K,Takaoka A,et al.,IRFfamily of transcription factors as regulators of host defense[J].Annu RevImmunol,2001；19:623–55)。IRF7属于干扰素调节因子家族成员，其蛋白分子结构从氨基端到羧基端依次为DNA结合结构域(DNA binding domain,DBD)、组成性活化结构域(constitutive activation domain,CAD)、抑制结构域(inhibitory domain,ID)和病毒激活结构域(virus-activated domain,VAD)构成(Ning S,Pagano JS,Barber GN,IRF7:activation,regulation,modification and function[J].Genes Immun,2011；12:399–414)。

哺乳动物中的研究表明，当细胞受病毒侵袭时，细胞可通过模式识别受体如Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)中的TLR3、RIG样受体(RIG-I-like receptors,RLRs)中的RIG-I/MDA5等识别病毒的RNA结构，并通过其介导的细胞信号通路，诱导IRF7和IRF3发生磷酸化并活化，活化的IRF7分子可以自身形成同源二聚体复合物，或与IRF3形成异源二聚体复合物，并进入细胞核，结合到I型干扰素如IFN-β或者其他干扰素调节基因如ISG54(interferon stimulated gene 54)基因启动子区域，调节基因的表达，从而在受病毒感染的宿主细胞以及相邻细胞中诱导抗病毒状态的形成，在宿主的抗病毒免疫反应中发挥重要作用(Matsumiya T and Stafforini DM,Function and regulation of retinoic acid-inducible gene-I[J].Crit Rev Immunol,2010；30:489–513)。鉴于干扰素调节因子IRF7功能的重要性，研究其基因的表达调控机制对于揭示宿主的抗病免疫反应及细胞信号转导通路具有重要意义。哺乳动物中的研究中，已有通过克隆干扰素调节因子IRF7的启动子，构建荧光素酶报告基因系统，研究干扰素调节因子IRF7的调控及介导的细胞信号转导通路的相关报道(Ning S,Huye LE,Pagano JS,Regulation of the transcriptional activityof the IRF7promoter by a pathway independent of interferon signaling[J].JBiol Chem,2005；280:12262–70)。