[发明专利]一种丽蕾金线兰多糖提取物的制备方法及应用

说明书

本发明涉及一种丽蕾金线兰多糖提取物的制备方法，制备方法包括原料脱脂后，再经过水提取、醇沉淀得到粗多糖，粗多糖经过透析、离子交换层析脱去蛋白、色素，除去小分子化学成分，制成较高纯度的丽蕾金线兰多糖提取物。本发明提取物中丽蕾金线兰多糖的含量以葡萄糖计，所述多糖的含量占丽蕾金线兰提取物重量百分比74％以上。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种具有抗疲劳作用的丽蕾金线兰多糖提取物的制备方法及其用途。

背景技术

疲劳是一种常见的生理现象，其过程为过度劳动或运动引起机体生理生化功能改变而导致机体劳动或运动能力的暂时降低，实际上疲劳是防止机体发生机能衰竭而产生的一种保护性反应。疲劳可以导致精神不振、注意力不集中、抵抗力下降等一系列后果，严重影响工作效率或运动成绩，故研究延缓或消除疲劳的措施具有十分重要的意义。目前市场上用于抗疲劳的化学药物在延缓疲劳和消除疲劳方面具有一定的效果，但是长期服用，具有一定的成瘾性和依赖性，因此限制了其临床应用。因此，从天然植物资源中提取安全、有效、不含对人体有害成分的抗疲劳成分已成为近年来抗疲劳药物的研究热点。

丽蕾金线兰为兰科开唇兰属植物丽蕾金线兰Anoectochilus lylei Rolfe exDownie 的新鲜或干燥全草。现有关于丽蕾金线兰的研究较少，未见其具有抗疲劳作用的相关报道。

发明内容

本发明目的之一是提供一种具有确切的抗疲劳活性， 无毒副作用的丽蕾金线兰多糖提取物的制备方法。

本发明的目的之二是将上述丽蕾金线兰多糖提取物制成各种抗疲劳药物制剂或制备其他抗疲劳药物的原料药。

本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：

一种丽蕾金线兰多糖提取物的制备方法，丽蕾金线兰原料药材脱脂后，再经过水提取、 醇沉淀得到粗多糖，粗多糖经过透析、离子交换层析脱去蛋白、色素，除去小分子化学成分，制成较高纯度的丽蕾金线兰多糖提取物。

其包括以下具体步骤：

（1）将丽蕾金线兰药材用高浓度乙醇回流除去脂溶性杂质；

（2）残渣加水加热提取，滤液浓缩，加入乙醇醇沉，离心得沉淀；

（3）沉淀依次用无水乙醇、丙酮分别洗涤；

（4）洗涤后的沉淀用蒸馏水溶解后透析；

（5）透析液浓缩至一定体积，采用阳离子交换树脂法脱去多糖中的色素和蛋白质；

（6）将除去色素和蛋白质的洗脱液浓缩，加入乙醇醇沉，离心得多糖沉淀；

（7）多糖沉淀依次用无水乙醇、丙酮分别洗涤，干燥，即得丽蕾金线兰多糖提取物。

为了达到更好的提取效果，优选的，

步骤（1）中将丽蕾金线兰用10～14倍重量的80～95％乙醇回流脱脂2～3 次，每次回流1.5～3h；

步骤（2）中将残渣加 10～16倍重量的蒸馏水加热提取2～3次，每次提取2～3h，合并提取液，将提取液浓缩，浓缩液与原药材的体积质量比为1～3：1，加入95％乙醇醇沉至含醇量为80％，静置12h，离心得收集沉淀；

步骤(3)、(7)中将沉淀依次用2～4倍重量的无水乙醇、丙酮分别洗涤；

步骤(4)中的沉淀以10～50倍重量的蒸馏水复溶，用截留相对分子量3500以上的透析袋透析24～72h。

步骤(5)中将多糖透析液通过JK008型、732 型阳离子交换树脂，收集过柱液，然后用3倍柱体积的蒸馏水洗脱，流速为2 BV/h。