[发明专利]一种丹参地上茎叶部分综合利用的方法有效
申请号: | 201710462837.1 | 申请日: | 2017-06-19 |
公开(公告)号: | CN107174598B | 公开(公告)日: | 2020-09-04 |
发明(设计)人: | 李艳玲 | 申请(专利权)人: | 山东第一医科大学(山东省医学科学院) |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;A61K36/537;C12R1/645;A61K135/00;A61K127/00 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 吕薇 |
地址: | 250012 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 丹参 地上茎 部分 综合利用 方法 | ||
1.一种对丹参地上茎叶部分进行有效成分提取制备的方法,其特征是,包括以下步骤:
(1)丹参地上茎叶中总丹参酮、总酚酸和多糖的联合提取:
1)总丹参酮的提取:
将丹参地上茎叶进行粉碎,然后采用乙醇溶液进行超声波提取,提取后固液分离,得到药渣1和含有总丹参酮的提取液;
其中,提取的工艺参数为:乙醇溶液的体积分数为85~89%,液料比为40~42:1,提取温度为48~52℃;
2)总酚酸的提取:
将药渣1采用乙醇溶液进行超声波提取,提取后固液分离,得到药渣2和含有总酚酸的提取液;
其中,提取的工艺参数为:乙醇溶液的体积分数为40~45%,液料比为20~25:1,提取温度为40~45℃;
3)多糖的提取:
将药渣2采用乙醇溶液进行超声波提取,提取后固液分离,得到药渣3和含有多糖的提取液;
(2)白黄小脆柄菇菌种活化、液体发酵种子液制备:
将白黄小脆柄菇接种于固体马铃薯综合培养基上进行活化,然后接种到液体培养基上,震荡培养后作为种子液;
(3)白黄小脆柄菇固态发酵药渣3产纤维素酶:
将药渣3过筛,加水,浸泡设定时间,灭菌冷却,制成固态发酵培养基;然后接种白黄小脆柄菇种子液后进行培养,用来提取纤维素酶;
(4)纤维素酶粗酶液的制备:
固态发酵培养结束后,将发酵培养物干燥、粉碎过筛,然后加入乙酸-乙酸钠缓冲液,在恒温35~40℃下提取1~1.5h,提取后的提取液经离心,得到上清液,即为粗酶液。
2.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(1)中,三种物质的超声波提取的功率为220~250W,提取时间为30~40min。
3.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(1)中,所述超声波提取的功率为250W,提取时间为40min。
4.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(1)中,对于总丹参酮的提取,提取的工艺参数为:乙醇溶液的体积分数为88%,液料比为40.8:1,提取温度为50℃。
5.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(1)中,对于总酚酸的提取,提取的工艺参数为:乙醇溶液的体积分数为41.2%,液料比为20.2:1,提取温度为40.6℃。
6.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(1)中,对于多糖的提取,提取的工艺参数为:乙醇溶液的体积分数为11.44%,液料比为43.2:1,提取温度为42.3℃。
7.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(1)中,总丹参酮的提取采用响应面法设定提取的变量参数,所述响应面法设定提取的变量参数通过以下二次回归方程模型:Y=0.71-0.014A+0.00625B-0.0025C+0.000AB-0.0075AC+0.013BC-0.039A2-0.039B2-0.047C2;
总酚酸的提取采用响应面法设定提取的变量参数,所述响应面法设定提取的变量参数通过以下二次回归方程模型:
Y=3.62+0.10A+0.018B+0.064C-0.053AB-0.090AC+0.042BC-0.41A2-0.38B2-0.42C2;
多糖的提取采用响应面法设定提取的变量参数,所述响应面法设定提取的变量参数通过以下二次回归方程模型:
Y=2.98+0.046A+0.14B+0.079C-0.025AB+0.14AC+0.000BC-0.24A2-0.21B2-0.21C2;
其中,Y为相应物质的提取率,A为乙醇溶液的体积分数,B为液料比,C为温度。
8.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(2)中,活化时间为6~7天;震荡培养的时间为3~5天。
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