[发明专利]一种暗紫贝母野生鳞茎快速繁殖的方法

说明书

本发明公开了一种暗紫贝母野生鳞茎快速繁殖的方法，该方法包括以下步骤：无菌小鳞片的获得；无菌小鳞片愈伤组织和丛生芽的诱导；丛生小鳞茎的增殖培养；再生小鳞茎的生根诱导；生根小鳞茎的移栽驯化。采用本发明的技术方案，暗紫贝母增殖率较前人研究有所提高；解决了暗紫贝母再生小鳞茎增殖过程中易褐化、生根难、畸形根多等问题。

技术领域

本发明属于农业技术领域，涉及一种暗紫贝母野生鳞茎快速繁殖的方法。

背景技术

暗紫贝母(Fritillaria unibracteata Hsiao et K.C.Hsia)为百合科贝母属植物，是我国特有的名贵中药材，也是贝母中经济价值最高的类群，它以地下干燥鳞茎入药，具有止咳化痰、清热润肺及散结等多重药效(中国植物志编辑委员会，1980；徐国钧，1997；韵海霞，2010)。尤其适合于老年人和儿童久治不愈的顽固性虚寒咳嗽。该物种主要分布于四川西北部(松潘、若尔盖、马尔康、刷经寺、洪源、理县)、青海南部以及甘肃南部等地，生长于海拔2800～4500m的高山草地以及高山草甸和灌丛草地中，分布范围十分有限，并且生长过程中对土壤、气候、温度等生长环境条件要求苛刻(马吉义，2011)。由于暗紫贝母在中药材市场上的需求量逐年攀升，导致人们过度采挖，野生资源极度匮乏，商品供不应求，暗紫贝母价格不断上涨，但是限于生长环境特殊，鳞茎生长周期长，从种子播种到长成商品药材一般需要四年时间(Gao S L，1999；马吉义，2011)，且种子萌发率低，大大限制了暗紫贝母的人工规模化栽培。因此如何保护这一濒危种质资源，扩大其种植规模以满足市场需求，就成为一个急待解决的问题。

近年来关于暗紫贝母的研究报道日趋增多，其中，较多的研究主要在化学成分的测定和比较(Kaneko K，1986；余世春，1990和1992；颜晓燕，2012)；药理作用上多针对川贝母，对暗紫贝母的的研究相对较少(高山林，2000)。在生态学方面，研究的内容涉及到暗紫贝母的生态分布及植被性质(陈士林，1993和1997；徐波，2013)，以及暗紫贝母个体生长和物候与融雪梯度和海拔梯度之间的关系(陈文年，2012和2013)。人工种子繁殖上，由于种子采集困难，休眠期长，且存在形态后熟和生理后熟，播种后出苗率低，难以形成规模化种植(于婧，2008)。组织培养是利用生物技术快速繁育植物种苗的主要手段之一，对于利用组培技术繁殖暗紫贝母的研究上虽有一定的报道(蔡朝辉等，1992；李隆云等，1995；高山林等，2000)，但多限于试验性的探讨以及组培鳞茎和野生鳞茎的化学成分比较分析，快速繁育种苗的技术体系尚未成熟，离幼苗规模化生产还有一定的距离；对组培苗的炼苗驯化栽培方面亦未见报道。

暗紫贝母的增殖增殖率不高、在增殖过程中易出现玻璃化和褐化现现，生根难和粗短肉质根出现频率较高等系列问题，影响整个快速繁殖体系。总体而言，目前暗紫贝母的人工繁育及栽培实际上还处于实验阶段，尚未形成真正意义上的规模化种植。这其中，不能大量地生产人工种苗正是限制其规模化种植的瓶颈。鉴于人们对暗紫贝母药用价值的扩大认识后，必将进一步加速市场的需求量，野生资源现已极度匮乏，这就为暗紫贝母人工规模化栽培提供契机。因此，通过生物技术手段解决暗紫贝母栽培过程中的种苗问题将是发展暗紫贝母规模化种植的必然趋势。

发明内容

本发明的目的在于提供一种暗紫贝母野生鳞茎快速繁殖的方法，采用L₁₆(4⁵)正交试验法和系统试验法筛选适宜暗紫贝母种苗快速繁育的培养基配方，解决了暗紫贝母小鳞片无菌繁殖过程中增殖率不高、易褐化、生根难等技术问题。

其具体技术方案为：

一种暗紫贝母野生鳞茎快速繁殖的方法，包括以下步骤：