[发明专利]一种生物瓣膜的制备方法

说明书

本发明提供了一种生物瓣膜的制备方法，包括如下步骤：S1：将生物组织材料进行脱细胞处理，得到脱细胞处理后的生物组织；S2：将脱细胞处理后的生物组织浸没在含有GAG的缓冲溶液中；S3：将经过S2处理后的生物组织利用GAG交联剂溶液进行交联处理；S4：将经过S3处理后的生物组织经过清洗液清洗，然后再利用胶原蛋白交联剂溶液进行交联处理；S5：将经过S4处理后的生物组织利用清洗液清洗，得到生物瓣膜。通过本发明处理的生物组织制备得到的生物瓣膜，可显著减轻甚至消除组织褶皱，降低组织弯曲产生的应力，增强组织的柔顺性，提高组织材料的使用率，大大降低生产成本。

技术领域

本发明属于医疗器械领域，涉及一种生物瓣膜的制备方法。

背景技术

人工生物瓣膜主要采用猪主动脉瓣膜、牛心包和猪心包等动物源性生物组织材料制备而成，这类生物组织材料主要由胶原纤维、弹性纤维和GAG等组成。

动物源性生物组织材料在制备人工生物瓣膜的过程中，一般都会经戊二醛固定处理，但经过戊二醛固定处理后的组织会变硬，在组织弯曲时易形成褶皱。制备好的人工生物瓣膜在植入体内后，瓣叶在启闭过程中,在沿瓣架处会急剧弯曲形成褶皱，导致瓣叶中的胶原纤维极易损伤。一旦胶原纤维受损,生物组织的抗拉强度将大大降低，如果胶原纤维受损严重,易造成瓣叶撕裂，导致生物瓣膜耐久性降低。

在整个瓣膜损坏的过程中，沿瓣架处的弯曲挤压的应力起着主要作用。因此，在改进生物瓣的固定处理方法和抗钙化方法时,应当考虑机械应力,特别是怎样降低褶皱，减少弯曲变形的应力。研究发现，氨基聚糖(Glycosaminoglycans,GAG)是重复二糖单位构成的无分枝长链多糖，由许多硫酸基和羰基而带负电荷，能支撑较大的压缩载荷，起到“分子弹簧”的作用，广泛存在于心脏瓣膜和其他心血管结缔组织。在瓣膜运动过程中，GAG可以保持水化的环境，由于其“分子弹簧”的作用，在瓣叶弯曲时起到缓冲作用，能够降低组织弯曲时的应力，达到消除褶皱的作用。

人工生物瓣膜在制备过程中一般由0.2％～0.6％(V/V)戊二醛缓冲液交联处固定，但戊二醛不能固定瓣膜组织中的GAG，导致组织中的GAG在组织清洗、固定、保存等处理工艺中一直丢失。因此降低GAG的丢失对减轻或消除组织的褶皱有着重要作用。

现有技术中公开了一种采用硫酸新霉素预处理，1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)(EDC/NHS)和戊二醛交联来固定心瓣组织的方法，这种制备方法可以避免GAG的丢失，从而降低瓣叶的褶皱。但硫酸新霉素是一种氨基糖苷类抗生素，在后续的交联中可能与胶原的羧基反应保留在组织中，从而导致一定的毒性和引起过敏性反应，对人体造成不适。现有技术中还公开了一种采用1,6-己二胺和EDC/NHS固定处理动物源性生物组织的方法，以提高组织的抗钙化效果；另外，也有技术公开了采用氨基封闭剂、EDC/NHS和填充剂(Jeffamine)交联动物源胶原基材料的方法，以提高胶原材料的拉伸强度。但这些技术只是采用EDC/NHS来交联生物组织，并没有公开怎样保留GAG和怎样降低组织褶皱。

综上可以看到，目前还没有一种人工生物瓣膜的制备方法，能够在不影响人工生物瓣膜安全性的同时，尽可能避免GAG的丢失，以提高制备得到的人工生物瓣膜的耐久性。

发明内容

本发明的目的之一在于，提供一种抗钙化性能和耐久性效果好的人工生物瓣膜的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种生物瓣膜的制备方法，包括如下步骤：

S1：将生物组织材料进行脱细胞处理，得到脱细胞处理后的生物组织。

S2：将所述脱细胞处理后的生物组织浸没在含有GAG的缓冲溶液中。

S3：将经过所述S2处理后的生物组织利用GAG交联剂溶液进行交联处理。