[发明专利]一种选择识别氧氟沙星的硅基水凝胶载药体系的制备方法

权利要求书

1.一种选择识别氧氟沙星的硅基水凝胶载药体系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：采用3-甲基丙烯酰氧基三(三甲基硅氧基)硅烷TRIS，N,N-二甲基丙烯酰胺DMA和双-3-甲基丙烯基氧丙基化四甲基二硅氧烷DMS为原料，加入交联剂和引发剂以紫外辐照法合成硅基水凝胶；

步骤2：在所合成硅基水凝胶的基础上，用油酸对其进行表面修饰，以氧氟沙星为模板分子，用本体聚合法在表面合成了选择性识别氧氟沙星的分子印迹聚合物水凝胶膜MIPs；

步骤3：分别对氧氟沙星分子印迹聚合物的官能基团及形貌进行测试表征，并研究分子印迹聚合物的选择性识别性能和抗菌性能；

所述步骤1中包括下列具体步骤：

①将双-3-甲基丙烯基氧丙基化四甲基二硅氧烷DMS，N,N-二甲基丙烯酰胺DMA和3-甲基丙烯酰氧基三(三甲基硅氧基)硅烷TRIS以体积比为2:2:6～1:3:6混合；

②添加乙二醇二甲基丙烯酸酯EGDMA和N-乙烯基吡咯烷酮NVP体积比为1:10～1:15的混合物；

③通10～20min氮气后，乙醇和二苯基氧化膦TPO以体积比为1:30～1:100加入，并搅拌3～7min；

④将反应液倒入模具中，然后紫外灯辐照30～50min进行聚合；将得到的水凝胶浸泡在20～40％的乙醇中过夜除去未反应的残留物；所合成的硅基水凝胶产物记作NVP水凝胶；

所述步骤2中包括下列具体步骤：

①预聚合混合物的制备

称取硅基水凝胶，加入油酸与乙二醇二甲基丙烯酸酯EGDMA以体积比为1:3～1:5修饰水凝胶表面，即得水凝胶-EGDMA混合物；称取氧氟沙星，氧氟沙星与硅基水凝胶质量比为1:6～1:35，量取甲基丙烯酸MAA，加入到去离子水中，甲基丙烯酸与去离子水的体积比为1:10～1:50，室温下摇床振荡5～15分钟使得MAA与药物分子结合得到预装配溶液；将水凝胶–EGDMA混合物和预装配溶液混合后超声20～40min得到预聚合混合物；

②氧氟沙星分子印迹聚合物的制备

将聚乙烯吡咯烷酮PVP溶于70～90％乙醇溶液，浓度为0.002～0.01mg/ml，于50～70℃条件下通氮气除去氧气；在混合溶液中加入预聚合混合物与偶氮二异丁腈AIBN，其中偶氮二异丁腈AIBN与硅基水凝胶质量比为1:300～1:700，50～70℃条件下水浴并200～400rpm磁力搅拌20～28h即得氧氟沙星分子印迹聚合物MIPs；将氧氟沙星分子印迹聚合物MIPs以体积比为3:1～5:1的甲醇/乙酸混合溶液洗涤数次，直至检测不到药物分子；然后以去离子水洗涤三次，干燥待用。

2.根据权利要求1所述的一种选择识别氧氟沙星的硅基水凝胶载药体系的制备方法，其特征在于：

所述步骤3中包括下列具体步骤：

①称取氧氟沙星印迹硅基水凝胶置于锥形瓶中，加入氧氟沙星溶液，其pH＝7.40；25℃下在摇床中恒温振荡吸附；24h后，用紫外分光光度计测定吸附后的氧氟沙星溶液在286nm处的吸光度，并根据吸附前后溶液浓度的变化计算吸附容量；

②称取MIPs水凝胶置于氧氟沙星水溶液中，25℃下在摇床中振荡吸附，每隔两小时测量药物溶液的吸光度，并计算吸附量；同等条件下，分别称取MIPs水凝胶，置于与氧氟沙星结构相似的绿原酸和杨梅素水溶液中，研究印迹聚合物的选择性吸附性能；

③用棉签蘸取浓度为106CFU/ml的金黄色葡萄球菌菌液，将其均匀涂布在Muller-Hinton琼脂培养基上；待菌液被琼脂完全吸收后贴药敏纸片，所用药敏纸片为链霉素和头孢噻肟；然后分别将灭菌后未吸附药物的分子印迹水凝胶和吸附氧氟沙星的分子印迹聚合物水凝胶圆片贴于琼脂培养基上；37℃条件下培养24h后测量抑菌环直径，评价样品的抗菌性。

3.根据利要求2所述的一种选择识别氧氟沙星的硅基水凝胶载药体系的制备方法，其特征在于：所述步骤1中，乙二醇二甲基丙烯酸酯EGDMA的体积为0.015ml，乙醇体积为0.3ml；加入光引发剂二苯基氧化膦的质量为8mg；搅拌时间为5min；紫外灯辐照时间为50min；步骤④中的乙醇浓度为30％；

所述步骤2中，油酸与乙二醇二甲基丙烯酸酯EGDMA以体积比为21:79修饰水凝胶表面，即得水凝胶-EGDMA混合物，甲基丙烯酸MAA的量为34.5μl，聚乙烯吡咯烷酮PVP质量为0.04g，乙醇溶液浓度为80％。