[发明专利]α‑L‑鼠李糖苷酶基因及其应用在审
申请号: | 201710468317.1 | 申请日: | 2017-06-20 |
公开(公告)号: | CN107287223A | 公开(公告)日: | 2017-10-24 |
发明(设计)人: | 王俊;王方芹;张凡;何殊 | 申请(专利权)人: | 江苏科技大学 |
主分类号: | C12N15/56 | 分类号: | C12N15/56;C12N15/81;C12N9/24;C12R1/865 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司32200 | 代理人: | 楼高潮 |
地址: | 212003*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 糖苷酶 基因 及其 应用 | ||
1.一种α-L-鼠李糖苷酶基因,其特征在于所述基因序列如SEQ ID NO.3所示。
2.一种含有α-L-鼠李糖苷酶基因的载体,其特征在于含有如SEQ ID NO.3所示序列的α-L-鼠李糖苷酶基因。
3.根据权利要求2所述的含有α-L-鼠李糖苷酶基因的载体,其特征在于所述载体的质粒片段来源于质粒pYD1。
4.一种含有α-L-鼠李糖苷酶基因的工程菌,其特征在于含有如SEQ ID NO.3所示的α-L-鼠李糖苷酶基因。
5.根据权利要求4所述的含有α-L-鼠李糖苷酶基因的工程菌,其特征在于所述工程菌的质粒载体为pYD1。
6.根据权利要求4所述的含有α-L-鼠李糖苷酶基因的工程菌,其特征在于所述工程菌的宿主菌为酿酒酵母EBY100。
7.权利要求4~6任一所述工程菌表达α-L-鼠李糖苷酶的方法,其特征在于将工程菌接种到YNB-CAA-葡萄糖培养基中,生长到指数期,然后经半乳糖诱导α-L-鼠李糖苷酶表达,离心,收集菌体;所述的半乳糖浓度为1%-2%g/L;诱导温度为20℃;诱导时间为0~72h。
8.权利要求4~6任一所述工程菌在水解黄酮类化合物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于将所述工程菌加入到含有黄酮类化合物的缓冲液中,pH5.0-6.0,振荡反应;所述的缓冲液为柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液;所述的反应温度为40-50℃;所述的反应时间为1-6h。
10.一种水解黄酮类化合物的全细胞催化剂,其特征在于所述全细胞催化剂包括权利要求4~6任一所述的含有α-L-鼠李糖苷酶基因的工程菌。
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