[发明专利]延长脑细胞寿命的深海鱼提取物的制备方法

权利要求书

1.延长脑细胞寿命的深海鱼提取物的制备方法，包括分步酶解、微滤、二次超滤并纳滤、大孔树脂吸附洗脱和冷冻干燥，其特征在于：所述的分步酶解步骤为在深海鱼鱼糜中加入条斑紫菜蛋白酶和活性短肽酶解，调节pH后加入风味蛋白酶酶解，得到酶解液。

2.根据权利要求1所述的延长脑细胞寿命的深海鱼提取物的制备方法，其特征在于：所述的深海鱼鱼糜中加入20~30倍体积水，条斑紫菜蛋白酶的加入量为5~8wt‰，酶解温度25~35℃，pH为7.0~9.0，酶解时间为30~40min，酶解结束后灭酶。

3.根据权利要求1所述的延长脑细胞寿命的深海鱼提取物的制备方法，其特征在于：所述的风味蛋白酶加入量为1~3wt﹪，酶解pH为6.0~7.0，酶解温度为52~60℃，酶解时间为15~25min，酶解结束后灭酶，过滤取滤液。

4.根据权利要求1所述的延长脑细胞寿命的深海鱼提取物的制备方法，其特征在于：所述的活性短肽的加入量为条斑紫菜蛋白酶质量的10~20﹪，氨基酸序列为SCASVCKARCRACRRGCGSVFCRCLRC。

5.根据权利要求1所述的延长脑细胞寿命的深海鱼提取物的制备方法，其特征在于：所述的微滤步骤为将滤液于20~30℃，0.14~0.27MPa条件下经0.2~0.4μm微滤膜微滤。

6.根据权利要求1所述的延长脑细胞寿命的深海鱼提取物的制备方法，其特征在于：所述的二次超滤并纳滤步骤为先采用截留相对分子质量20~30kD的膜超滤，再采用截留相对分子质量1~3kD的膜超滤，最后将滤过液进行纳滤除盐。

7.根据权利要求6所述的延长脑细胞寿命的深海鱼提取物的制备方法，其特征在于：所述的二次超滤的条件分别为：超滤温度为20~30℃，操作压力为0.14~0.25MPa，超滤时间为40~70min；超滤温度为20~30℃，操作压力为0.6~1MPa，超滤时间为1~2h。

8.根据权利要求1所述的延长脑细胞寿命的深海鱼提取物的制备方法，其特征在于：所述的大孔树脂吸附洗脱步骤为将纳滤后的液体浓缩，上样浓度为0.1~0.3g/mL，上样流速为0.4~0.6mL/min，洗脱剂体积为7.7~7.9BV，洗脱剂为蒸馏水，洗脱流速为0.8~1.4mL/min。

9.根据权利要求1所述的延长脑细胞寿命的深海鱼提取物的制备方法，其特征在于：所述的冷冻干燥步骤为：预冻：-35~-45℃预冻3~5h；冷冻干燥：-45~-35℃，3~5Pa冷冻干燥5~7h，-10~-5℃，10~20Pa冷冻干燥2~3h；升华干燥：10~15℃，50~60Pa升华干燥3~4h；解析干燥:7~14℃，3~5Pa解析干燥2~4h，得到延长脑细胞寿命的深海鱼提取物。

10.根据权利要求1所述的延长脑细胞寿命的深海鱼提取物的制备方法，其特征在于：所述的深海鱼为秋刀鱼或马面鱼或海鲈或金枪鱼或鲮鱼或鳕鱼。