[发明专利]一种结核杆菌OS-tb寡糖缀合物及其制备方法与应用

说明书

本发明提供了一种结核杆菌OS‑tb寡糖缀合物及其制备方法与应用，所述结核杆菌OS‑tb寡糖缀合物中，寡糖的化学结构是明确且单一的，而非混合物，可以通过化学方法大量合成，通过设计连接体与载体偶联，制备抗原，能够解决卡介苗免疫保护力低和不稳定的问题，对某些免疫力低下的特殊人群同样会产生较好的免疫效果，在制备结核疫苗中具有广泛应用价值。

技术领域

本发明涉及生物制品技术领域，尤其是一种结核杆菌OS-tb寡糖缀合物及其制备方法与应用。

背景技术

结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，Mtb)感染引起的慢性传染病。全世界大概有1/3的人感染MTB，其中5％～10％的感染者发展为TB患者，每年大约有200万结核病患者死亡。结核病化学治疗已是比较完善的治疗控制结核病的有效方法。但是，随着原发及获得性耐多药结核病以及广泛耐药结核病的增多，目前的结核病化学治疗面临着各种挑战。化疗虽然能改善患者的病情，延长生命，却给患者带来痛苦大、毒副作用强及严重不良反应等缺点。至今，卡介苗(BCG)仍是预防结核病唯一可用疫苗，但其免疫保护效果不稳定，保护率从0到80％。对于有免疫缺陷的患者，接种卡介苗有可能导致结核的感染。目前，越来越多的国家面临多重耐药菌株感染、HIV合并感染，新型结核疫苗的研发迫在眉睫。

在结核杆菌的细胞壁外层有三个主要的脂聚糖，包括脂阿拉伯糖甘露糖聚合物(LAM)，脂甘露糖聚合物(LM)以及磷脂酰肌醇甘露糖苷(PIM)，其中PIM与LM是LAM前体，它们通过非共价偶联到细胞壁的质膜上。

LAM是所有结核杆菌细胞壁外层中一个主要的、结构独特的脂聚糖，它占结核杆菌重量的15％，是主要的糖抗原，LAM是以甘露糖为核心结构，阿拉伯糖为分支的多聚物对于结核杆菌感染机体，LAM是一种重要的免疫调节物质，有文献报道，LAM有免疫抑制作用，例如有规律的下调T细胞的增殖，抑制IFN-γ干扰素调节巨噬细胞的活化，考虑到LAM本身的广泛的生物活性。

糖类及其衍生物是20年来最成功的细菌性疫苗靶点。人类利用糖类靶点成功开发出肺炎链球菌感染，细菌性脑膜炎，嗜血流感杆菌感染，伤寒，痢疾等疫苗。为了避免LAM整个分子的免疫抑制作用，去掉脂质部分，得到AM的多糖衍生物，后与不同的载体蛋白结合得到结合疫苗，包括纯化后的MTB蛋白Ag85B(75kDa)，破伤风类毒素(TT)，这些结合疫苗在小鼠中显示出非常好的保护效力，在豚鼠的动物实验中，可以延长存活期，减少病变。

由于这类天然糖抗原结构复杂性和不稳定性，以及从致病菌中直接分离纯化的困难，因此，大量合成这种寡糖分子对于在分子水平上研究其功能是具有非常重要的意义。但是，虽然近年来化学法合成寡糖获得了快速的发展，但依然没有一个统一、有效的普适性方法。以结构单一的结核杆菌核心寡糖片段OS作为抗原，与载体偶联制备寡糖缀合物疫苗，尚未见相关报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种结核杆菌OS-tb寡糖缀合物。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述结核杆菌OS-tb寡糖缀合物的制备方法。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述结核杆菌OS-tb寡糖缀合物的应用。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种结核杆菌OS-tb寡糖缀合物，结构通式如下：

其中，寡糖是如下通式(Ⅱ)、(Ⅲ)中的任一寡糖：

式(Ⅰ)、(Ⅱ)和式(Ⅲ)中，a是1到4中的任意一个整数，b是1到4中的任意一个整数，m是1到30中的任意一个整数；