[发明专利]一种菌丝长势好的灵芝菌种复壮方法

权利要求书

1.一种菌丝长势好的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：包括提纯、菌种制备、一次培养和二次培养。

2.根据权利要求1所述的菌丝长势好的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：具体包括以下步骤：

（1）提纯：试管用70-80%的酒精消毒后，擦拭干净，置于100万级超净工作台，用紫外灯消毒25-35min，装入培养基，培养基的装入量为试管体积的2/3，取零代母种菌丝生长最前端1-2cm内的菌丝小块，放入培养基中，用培养基覆盖菌丝小块，覆盖厚度为1-1.5cm，塞入试管塞，放入25-28℃的恒温箱中进行培养5-7天，得灵芝母种；

（2）灵芝菌种的制备：灵芝母种继续培养10-15天，得灵芝菌种；

（3）一次培养：取玉米粉，加水拌湿使得玉米粉的含水量为50-60%的玉米粉培养基，将灵芝菌种置于小米粉培养基中，于20-30℃下培养8-12天后，得一次培养灵芝菌种；

（4）二次培养：将一次培养灵芝菌种转入装有培养基的试管中，塞入试管塞，于25-28℃培养，待菌丝生长满试管时停止培养，即可。

3.如权利要求2所述的菌丝长势好的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：所述培养基按重量份计算，主要由葡萄糖15-25份、酵母膏3-5份、土豆180-220份、蛋白胨1.5-2.5份、海藻粉15-25份、蜈蚣粉0.3-0.5份、蛇床子10-20份、野菊花1-10份、大蒜1-10份和莎草5-15份制成。

4.如权利要求3所述的菌丝长势好的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：所述培养基按重量份计算，主要由葡萄糖18-22份、酵母膏3-5份、土豆190-210份、蛋白胨1.8-2.2份、海藻粉18-22份、蜈蚣粉0.3-0.5份、蛇床子13-17份、野菊花3-7份、大蒜3-7份和莎草8-12份制成。

5.如权利要求4所述的菌丝长势好的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：所述培养基按重量份计算，主要由葡萄糖20份、酵母膏4份、土豆200份、蛋白胨2.0份、海藻粉20份、蜈蚣粉0.4份、蛇床子15份、野菊花5份、大蒜5份和莎草10份制成。

6.如权利要求4-5中任一项所述的菌丝长势好的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：所述培养基按下述步骤制备：

（1）取蛇床子、野菊花、大蒜和莎草，加6-8倍量水，煎煮2-3h，过滤，取滤渣烘干后，粉碎成细颗粒，得A品；

（2）土豆切片，加5-7倍量水煮沸20-30分钟，过滤，滤渣加5-7倍量水继续，加热至50-60℃，得B品；

（3）B品中依次加入葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、蜈蚣粉、A品和海藻粉，边加边搅拌，搅匀后，得C品；

（4）C品分装至180ml试管的1/5，硅胶塞密封，6-8支用报纸包好，120-122℃下灭菌20-30min后，冷却至50-60℃，倾斜5-15度放置于20-35℃的烘箱中，放置24-48小时后，取出，即得。

7.如权利要求6所述的菌丝长势好的灵芝菌种复壮方法，其特征在于：所述培养基按下述步骤制备：

（1）取蛇床子、野菊花、大蒜和莎草，加7倍量水，煎煮2.5h，过滤，取滤渣烘干后，粉碎成细颗粒，得A品；

（2）土豆切片，加6倍量水煮沸25分钟，过滤，滤渣加6倍量水继续，加热至50-60℃，得B品；

（3）B品中依次加入葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、蜈蚣粉、A品和海藻粉，边加边搅拌，搅匀后，得C品；

（4）C品分装至180ml试管的1/5，硅胶塞密封，7支用报纸包好，120-122℃下灭菌25min后，冷却至50-60℃，倾斜10度放置于20-35℃的烘箱中，放置36小时后，取出，即得。