[发明专利]血液基因组DNA提取方法

权利要求书

1.一种血液基因组DNA提取方法，运用所述血液基因组DNA提取方法需使用血液基因组DNA提取试剂盒，所述血液基因组DNA提取试剂盒包括以下组分：

缓冲液GB、缓冲液BD、缓冲液GDB、漂洗液PWB、洗脱缓冲液TB、蛋白酶K、吸附柱、收集管、离心管；

其特征在于，所述血液基因组DNA提取方法包括以下步骤：

步骤1：提取200μL的血液样本；

步骤2：将200μL所述缓冲液GB和20μL所述蛋白酶K组合为预混液，将所述血液样本加入至所述预混液中，充分振荡混匀，获得第一混合液；

步骤3：所述第一混合液于56℃下放置一定时间，同时颠倒混匀，直至所述第一混合液变为清亮液体；

步骤4：将所述第一混合液于室温下放置2-5min，加入350μL所述缓冲液BD，充分颠倒混匀后瞬时离心，获得第二混合液；

步骤5：所述第二混合液加入至所述吸附柱中，所述吸附柱置入所述收集管中，于12000rpm下离心30sec，取出所述吸附柱，倒掉所述收集管中的废液，并将所述吸附柱放回所述收集管；

步骤6：向所述吸附柱中加入500μL所述缓冲液GDB，于12000rpm下离心30sec，取出所述吸附柱，倒掉所述收集管中的废液，并将所述吸附柱放回所述收集管；

步骤7：向所述吸附柱中加入600μL所述漂洗液PWB，于12000rpm下离心30sec，取出所述吸附柱，倒掉所述收集管中的废液，并将所述吸附柱放回所述收集管；

步骤8：向所述吸附柱中加入550μL所述漂洗液PWB，于12000rpm下离心2.5min，取出所述吸附柱，倒掉所述收集管中的废液，将所述吸附柱置入所述离心管中；

步骤9：打开所述吸附柱的盖子，于室温下放置2min；

步骤10：于所述吸附柱的吸附膜中间位置悬空滴加50-200μL所述洗脱缓冲液TB，室温放置2min后，于12000rpm下离心2min，于所述离心管中获得检测样本。

2.根据权利要求1所述的血液基因组DNA提取方法，其特征在于：所述血液基因组DNA提取试剂盒还包括缓冲液GS；

所述步骤一中，当血液样本的量少于200μL时，补充所述缓冲液GS至200μL。

3.根据权利要求2所述的血液基因组DNA提取方法，其特征在于：所述血液基因组DNA提取试剂盒还包括细胞裂解液CL；

所述步骤一中，当血液样本的量大于200μL少于1mL时，所述步骤一具体分为以下步骤：

步骤1.1：于所述血液样本中加入1-2.5倍所述血液样本体积的所述细胞裂解液CL，颠倒混匀后，于10000rpm下离心1min，吸去上层清液，留下细胞核沉淀；

步骤1.2：于所述细胞核沉淀中加入200μL所述缓冲液GS。

4.根据权利要求1所述的血液基因组DNA提取方法，其特征在于：所述步骤4中所述第二混合液中包含一定量的絮状沉淀；

所述步骤5中将包含所述絮状沉淀在内的所述第二混合液一并加入至所述吸附柱中。