[发明专利]马尾藻活性多肽的制备方法在审
申请号: | 201710481306.7 | 申请日: | 2017-06-22 |
公开(公告)号: | CN107488693A | 公开(公告)日: | 2017-12-19 |
发明(设计)人: | 张海玲 | 申请(专利权)人: | 舟山富晟食品科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K14/405;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/14 |
代理公司: | 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙)11548 | 代理人: | 李静 |
地址: | 316100 浙江省舟山市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 马尾藻 活性 多肽 制备 方法 | ||
1.马尾藻活性多肽的制备方法,包括细胞破碎、盐析、透析、蛋白酶解、超滤,其特征在于:所述纯化分离为:将脱腥后的酶解液经截留分子量为3-5KDa的超滤膜超滤,然后经截留分子量为200-300Da的纳滤膜纳滤,冷冻干燥即得马尾藻活性多肽。
2.根据权利要求1所述的马尾藻活性多肽的制备方法,其特征在于:所述超滤中马尾藻活性多肽的氨基酸序列为HSHAYYSVCGSHRGRCYCRCLRCRVLHPGKLCVCVNCSR。
3.根据权利要求1所述的马尾藻活性多肽的制备方法,其特征在于:所述细胞破碎中马尾藻粉与氢氧化钠溶液的料液比为1:35-40,氢氧化钠溶液的浓度为3-5%。
4.根据权利要求1所述的马尾藻活性多肽的制备方法,其特征在于:所述细胞破碎中超声波处理温度为45-50℃,功率为240-260W,时间为25-30min。
5.根据权利要求1所述的马尾藻活性多肽的制备方法,其特征在于:所述蛋白提取为:于3-5℃环境中,离心液加入乙醇,持续搅拌1-2min,静置4-5h,离心,去上清液,去除沉淀残余表面酒精,收集沉淀,用PBS溶液溶解沉淀。
6.根据权利要求5所述的马尾藻活性多肽的制备方法,其特征在于:所述蛋白提取中乙醇的浓度为90-95%,加入量为离心液体积的4-5倍。
7.根据权利要求5所述的马尾藻活性多肽的制备方法,其特征在于:所述蛋白提取中PBS溶液的溶度为0.09-0.11 mol/L、pH为6-7。
8.根据权利要求1所述的马尾藻活性多肽的制备方法,其特征在于:所述蛋白酶解中马尾藻蛋白与水的料液比为1:4-6。
9.根据权利要求1所述的马尾藻活性多肽的制备方法,其特征在于:所述蛋白酶解中加碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶低比为4-5%和3-4%,酶解pH为7-8,温度为50-55℃,时间为3-5h。
10.根据权利要求1所述的马尾藻活性多肽的制备方法,其特征在于:所述脱腥中β-环糊精的添加量为0.5-1wt%,脱腥温度为20-30℃,时间为80-100min。
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