[发明专利]基于牛BAF60c基因位点突变评估牛奶品质的方法

权利要求书

1.一种基于奶牛BAF60c基因位点突变评估牛奶品质的方法，其特征在于它由以下步骤组成：

（1）采集奶牛的生鲜牛奶样品，并从中提取奶牛基因组DNA；

（2）设计并合成奶牛BAF60c基因的特异性引物：

上游引物：5' - GTT ACC TGC CCT GAA TGT GG - 3'；

下游引物：5'-AGG ACA CCT GGA GAG ACC TG - 3'；

（3）采用步骤（1）提取的奶牛基因组DNA为模板，用步骤（2）中的特异性引物进行PCR扩增；

（4）将步骤（3）中的PCR扩增产物用Alu I限制性内切酶进行酶切，然后采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对酶切产物进行检测，根据电泳结果中的条带，判断T6060C位点的基因型，其中出现65bp、81bp和121bp三条带被判定为TT基因型，出现65bp、81bp、121bp和186bp四条带被判定为TC基因型，出现81bp、121bp和186bp 三条带被判定为CC基因型；

（5）根据T6060C位点的基因型来评估牛奶乳糖含量、乳蛋白含量和脂蛋比，如果基因型为TT型，该样品的乳糖含量为5.02%～5.06%、乳蛋白含量为2.98%～3.02%、脂蛋比为1.37～1.41；如果基因型为TC型，样品的乳糖含量为5.00%～5.06%、乳蛋白含量为2.84%～2.90%、脂蛋比为1.28～1.36；如果基因型为CC型，样品的乳糖含量为5.22%～5.32%、乳蛋白含量为3.22%～3.32%、脂蛋比为1.42～1.50。

2.根据权利要求1所述的基于奶牛BAF60c基因位点突变评估牛奶品质的方法，其特征在于：在步骤（2）中，所述PCR扩增的扩增长度为526bp。

3.根据权利要求2所述的基于奶牛BAF60c基因位点突变评估牛奶品质的方法，其特征在于：在步骤（2）中，所述PCR扩增的条件为：95℃，预变性5min；94℃，变性30s，60℃，退火40s，72℃，延伸30s，32个循环；72℃延伸10min。

4.根据权利要求1所述的基于奶牛BAF60c基因位点突变评估牛奶品质的方法，其特征在于：在步骤（4）中，所述的聚丙烯酰胺凝胶是将12g聚丙烯酰胺溶于100mL去离子水中制成，电泳检测的电压为120V、温度4℃、时间4h，并采用质量分数为0.1%的硝酸银染液对凝胶进行染色。