[发明专利]一种高立体选择性合成海兔毒素Dap片段的方法

说明书

技术领域

本发明属于制药合成工艺技术领域，具体涉及一种高立体选择性合成海兔毒素10(D10)的Dap片段的方法。

背景技术

海兔毒素是一种从食藻软体动物长尾背肛海兔的消化腺发现的海洋生物毒素之一，因此被命名为海兔毒素。海兔毒素有多种亚型，其中D10是研究最多的一种，是海兔毒素的代表。海兔毒素是一种强力的细胞微管蛋白抑制剂，对肿瘤细胞有较强的杀伤作用，现在已有以海兔毒素作为载体的抗体偶联药物上市销售，用以治疗癌症。海兔毒素由Dov、Vil、Dap、Dap、Doe片段组成，其中Dap片段包含三个手性中心，对Dap片段的不对称合成是合成海兔毒素所面临的关键问题之一。现有技术中陆续有关于Dap片段的合成方法的报道，例如：George R.Pettit等(“The Dolastatins；18:Stereospcific Synthesis of Dolaproine”,SYNTHESIS,1996,06,719-725)。用此方法合成的Dap片段立体选择性不高，需要分离异构体才能得到目的产物，且原料较昂贵，后处理较复杂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高立体选择性合成海兔毒素Dap片段的方法，本发明的方法原料廉价易得，副产物少，立体选择性高，易于工业化生产。

本发明海兔毒素Dap片段的合成方法，包括以下步骤：

(1)在有机溶剂中，以化合物(II)(L)-N-叔丁氧羰基脯氨醛和化合物(III)(R)-4-苄基-3-丙酰恶唑烷-2-酮为原料，在碱和助剂的作用下，进行羟醛缩合反应，得到中间体(I)；

制备的中间体(I)可通过以下两种方法制备目标化合物Dap片段：

方法一：

(2)在溶剂中，在碱和助剂的作用下，中间体(I)经水解反应，得到中间体(IV)；

(3)在有机溶剂中，中间体(IV)与碱、甲基化试剂发生甲基化反应，得到高立体选择性产物海兔毒素Dap片段。

方法二：

(4)在有机溶剂中，在干燥剂、缚酸剂和甲基化试剂的存在下，中间体(I)经甲基化反应，得到甲基化的中间体(V)；

(5)在溶剂中，在碱和助剂的存在下，中间体(V)经水解反应生成高立体选择性产物海兔毒素Dap片段。

所述反应过程如路线(1)所示：

步骤(1)中，所述有机溶剂选自二甲基甲酰胺、二氯甲烷、四氢呋喃氯仿、二氧六环、二甲基亚砜、1,2-二氯乙烷等中的一种或多种；优选地，为二氯甲烷或四氢呋喃。

步骤(1)中，所述碱选自DIPEA、三乙胺、碳酸钠、碳酸钾、LiHMDS、氢化钠等中的一种或多种；优选地，为三乙胺。

步骤(1)中，所述助剂选自三氟甲磺酸二丁硼、四氯化钛、三氯化铝等中的一种或多种；优选地，为三氟甲磺酸二丁硼。

步骤(1)中，化合物(II)、化合物(III)、助剂、碱的摩尔比为0.8：(0.8-1.5)：(0.8-1.5)：(0.8-1.5)；优选地，为0.8：0.9：1.0：1.1。

步骤(1)中，所述羟醛缩合反应的温度为-80℃—-20℃；优选地，为-75℃。

步骤(1)中，所述羟醛缩合反应的时间为1小时-5小时；优选地，为3小时。

步骤(1)中，所述羟醛缩合反应优选在氮气保护下进行。

步骤(1)中，所述羟醛缩合反应完成后还可以包括淬灭反应的步骤；所述淬灭剂选自双氧水、甲醇、乙醇、异丙醇等中的一种或多种；优选地，为双氧水、甲醇或其混合溶液，其中，为混合溶液时，所述双氧水和甲醇的体积比为1：1-1：4，优选地为1：2。

在一具体实施方式中，步骤(1)包括：将(R)-4-苄基-3-丙酰恶唑烷-2-酮加入反应瓶，加入有机溶剂中，搅拌溶解，降温至0℃，将反应瓶内气体换为氮气保护气，加入碱，加入三氟甲磺酸二丁硼，反应45分钟，继续降温至-75℃，缓慢加入(L)-N-叔丁氧羰基脯氨醛，反应1小时，升温至0℃，反应2小时，LC-MS检测反应进行程度，完成后加入双氧水和甲醇的混合溶液淬灭反应。旋除有机溶剂，用二氯甲烷提取两次，合并有机相，用碳酸氢钠和氯化钠洗两次，用无水硫酸钠干燥，柱层析即可得中间体(I)。

步骤(2)中，所述溶剂选自四氢呋喃、水、甲醇、乙醇、二氧六环等中的一种或多种；优选地，为四氢呋喃和水的混合溶剂，其中，所述四氢呋喃和水的体积比为(1-5)：1，优选地为4：1。

步骤(2)中，所述碱选自氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾等中的一种或多种；优选地，为氢氧化锂。