[发明专利]一种拮抗水稻黄单胞菌的溶杆菌及其分离方法与应用

说明书

本发明涉及一种拮抗水稻黄单胞菌的溶杆菌及其分离方法与应用，该溶杆菌分类命名为溶杆菌（Lysobacter sp.）OH23，已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏编号：CGMCC No.13677，保藏日期：2017年2月23日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。本发明溶杆菌（Lysobacter sp.）OH23为革兰氏阴性细菌，且对水稻条斑病菌和水稻白叶病菌具有明显的拮抗作用，具有被开发为生物农药的潜能。

技术领域

本发明属于水稻病害防治技术领域，涉及一种拮抗水稻黄单胞菌的溶杆菌及其分离方法与应用。

背景技术

水稻黄单胞菌(X.oryzae)，包括水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae)和水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola)两个致病变种，分别引起水稻白叶枯病(bacterial blight，BB)和细菌性条斑病(bacterial leaf streak，BLS)。目前，生产上对这两个病害的防治主要依靠抗病品种和化学农药。化学农药主要包括农用链霉素、叶枯灵、叶枯唑、噻唑锌等。化学农药防治具有防效好、见效快、成本低等优点，但长期过量并不当地施用引起的“3R”(残留、再猖獗、抗性)问题已经成为食品质量安全和生态安全关注的焦点。因此，寻找新的生防微生物或其代谢产物并开发为生态安全、环境友好的生物农药将是今后病害绿色防治的发展方向。

溶杆菌属(Lysobacter)细菌属于黄单胞科。截止2016年底，国际上已鉴定的溶杆菌属细菌有43个种，其中产酶溶杆菌(L.enzymogenes)、抗生素溶杆菌 (L.antibioticus)、变棕溶杆菌(L.brunescens)和胶状溶杆菌(L.gummosus) 这四个种具有高效抗菌活性和植物病害生防潜力，是一类新型植物病害生防细菌。这类细菌对植物病原真菌、卵菌、革兰氏阴性细菌(G^－)、阳性细菌(G⁺)和线虫都有显著的拮抗作用，其作用机理为：(1)产生小分子抗菌次生代谢物质；(2) 分泌产生大量胞外酶，包括几丁质酶、β-1,3-葡聚糖、蛋白酶和纤维素酶；(3) 诱导植物产生抗病性；(4)较好的定殖能力。因此，分离鉴定对水稻黄单胞菌具有拮抗活性的溶杆菌菌株，从中获得抗菌活性物质，可为新型农用抗生素的开发和水稻黄单胞菌病害的防治提供新途径。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种拮抗水稻黄单胞菌的溶杆菌及其分离方法与应用，该溶杆菌为革兰氏阴性细菌，且对水稻条斑病菌和水稻白叶病菌具有明显的拮抗作用，具有被开发为生物农药的潜能。

为解决现有技术问题，本发明采取的技术方案为：

一种拮抗水稻黄单胞菌的溶杆菌，分类命名为溶杆菌(Lysobacter sp.)OH23，已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏编号： CGMCCNo.13677，保藏日期：2017年2月23日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

本发明所述的菌株Lysobacter sp.OH23分离于江苏水稻根际土壤，其形态学及生理生化学特征如下：

形态学特征：在NA培养基、TSA培养基、LB培养基生长良好，菌落黄色； 10％TSA培养基生长较差，菌落白色；利用TSA培养基、LB培养基、10％TSA 培养基培养时菌落边缘平整，NA培养基上菌落边缘呈锯齿状；革兰氏阴性细菌，无鞭毛，可游动，单菌落扁平状，具有扩散性。

生理生化特征：简单碳源生长试验、几丁质酶活性、过氧化氢酶活性呈阳性；甲基红活性、V-P试验呈阴性；不能水解淀粉酶，能利用柠檬酸盐，能液化明胶。