[发明专利]一种快速测定鸡蛋中磺胺类和喹诺酮类药物残留的方法

说明书

本发明公开了一种快速测定鸡蛋中磺胺类和喹诺酮类药物残留的方法，它涉及鸡蛋样品检测技术领域。其步骤为：将鸡蛋样品用2%甲酸乙腈8mL提取，再加入pH7.0、0.1mol/L的EDTA缓冲液0.5mL震荡，用QuEChERS EMR‑Lipid快速样品提取技术净化，最后用0.2%甲酸溶液和乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱，应用电喷雾离子源的动态多反应监测对30种磺胺类药物和喹诺酮类药物进行定性和定量分析。本发明前处理简单易行，便于操作，方法精密度高，可以满足对鸡蛋中磺胺类药物和喹诺酮类药物快速、准确的检测要求，适合大批量样品的准确定性和定量分析。

技术领域

本发明涉及的是鸡蛋样品检测技术领域，具体涉及一种QuEChERS EMR-Lipid结合LC-MS/MS快速测定鸡蛋中磺胺类和喹诺酮类药物残留的方法。

背景技术

磺胺类抗生素(sulfonamides，sAs)是人工合成的具有对氨基苯磺酰胺结构的一类抗菌药物，喹诺酮类(4-quinolones)是一类含4-喹诺酮基本结构的抗菌药物，两类药物都因具有化学性质稳定、抗菌谱广、高效、低毒、价格低、使用方便等优点而被广泛应用到养殖业上，用来治疗和预防动物的疾病感染，并越来越受到养殖户的重视。但由于生产者用药不规范或不遵守正确的休药期等因素，导致sAs和FQs在畜禽体内过量积聚残留，污染了动物性食品，间接对人体产生过敏反应、泌尿系统损害等危害，重者可导致休克甚至死亡，某些药物还存在潜在的致癌性质。为此，世界各国普遍对食品中的sAs和FQs的限量提出了严格要求，并被许多国家列入抗生素禁用清单。目前，欧盟、美国、日本、韩国等国家均将磺胺类药物列为动物饲养过程中限制使用的药物，美国则禁止喹诺酮类药物应用于动物源性食品，我国农业部《兽药停药期规定》中也指出多种喹诺酮药物制剂在产蛋鸡中禁用，农业部公告第235号对动物源性食品中使用磺胺类药物的规定限量为总量不得大于100μg·kg^-1。

目前，国内外对sAs和FQs的分析检测方法主要有微生物检测法、酶联免疫吸附法、毛细管电泳法(CE)、高效液相色谱法(HPLC)及高效液相色谱—串联质谱法(HPLC-MS/MS)等，其中，HPLC-MS/MS法是检测动物源性食品中兽药残留的重要方法，这种方法结合液相保留时间，并采用多重反应监测(MRM)模式，对特征离子进行定量和定性分析，适合于复杂基质样品的检测，但目前检测sAs和FQs的LC-MS/MS方法主要集中在水产品、鸡肉、猪肉和牛奶等方面，未有文献报道鸡蛋中磺胺类药物的液相色谱-质谱/质谱法，可以同时检测鸡蛋中磺胺类药物和喹诺酮类药物的快捷方法更未见文献报道。基于此，结合最新QuEChERS EMR-Lipid快速样品提取技术的高效液相色谱-三重四级杆串联质谱联用仪法检测禽蛋中多种磺胺类药物和多种氟喹诺酮类药物的残留含量是食品安全技术发展所趋。

发明内容

针对现有技术上存在的不足，本发明目的是在于提供一种快速测定鸡蛋中磺胺类和喹诺酮类药物残留的方法，简单易行，便于操作，方法精密度高，可以满足对鸡蛋中磺胺类药物和喹诺酮类药物快速、准确的检测要求，适合大批量样品的准确定性和定量分析，易于推广使用。

为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：一种快速测定鸡蛋中磺胺类和喹诺酮类药物残留的方法，其步骤为：

(1)准备材料与试剂：QuEChERS EMR-Lipid快速萃取管，乙腈、甲醇、甲酸(均为HPLC纯试剂)，蒸馏水，以及目标分析物：磺胺噻唑(ST)、磺胺二甲异恶唑(SIZ)、磺胺多辛(SDM’)、磺胺甲基嘧啶(SM1)、磺胺氯哒嗪(SCP)、磺胺吡啶(SPD)、磺胺甲噻二唑(SMT)、磺胺甲氧哒嗪(SMP)、磺胺嘧啶(SD)、磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺地索辛(SDM)、磺胺甲恶唑(SMZ)、磺胺喹恶啉(SQ)、磺胺二甲嘧啶(SM2)、麻保沙星、洛美沙星、培氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、氧氟沙星、二氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、达氟沙星、吡哌酸、恶喹酸(奥索利酸)、依诺沙星(氟啶酸)、萘啶酸、氟甲喹、西诺沙星；