[发明专利]HES6作为分子靶标在治疗慢性粒细胞白血病的用途

说明书

本发明提供了一种慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia，CML）治疗的新分子靶标—HES6。相应，本发明提供一种基于HES6的用于慢性粒细胞白血病早期诊断试剂盒，进一步提供通过过表达HES6以促进K562细胞分化的方法。

技术领域

本发明属于生物医学与临床医学技术领域，涉及一个与慢性粒细胞白血病治疗相关的新治剂及其应用方法。

背景技术

HES6，位于人类染色体2q37.3，是HES转录家族中的一员，HES6作为一个转录调节因子，在许多组织中都有表达，而且它参与调控神经元发生、肌细胞生成和肠组织发育等生物学过程。成熟的HES6蛋白含224个氨基酸，其序列为：MAPPAAPGRDRVGREDEDGWETRGDRKARKPLVEKKRRARINESLQELRLLLAGAEVQAKLENAEVLELTVRRVQGVLRGRAREREQLQAEASERFAAGYIQCMHEVHTFVSTCQAIDATVAAELLNHLLESMPLREGSSFQDLLGDALAGPPRAPGRSGWPAGGAPGSPIPSPPGPGDDLCSDLEEAPEAELSQAPAEGPDLVRAALGA VTTAQIARSVWRPW。

HES6与前列腺癌、乳腺癌、转移性结肠癌、恶性胶质瘤等癌症有关，目前研究报道HES6能辅佐一些疾病如去势性前列腺癌、乳腺癌等疾病的诊断。

HES6在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia，CML)和红系分化中的功能国内外尚未见报道。本发明人首次研究发现，敲低HES6后能够延迟红系分化进程。在CML临床病人样本中，相较于正常人，HES6在CML初诊患者中的表达显著下降。当前临床上诱导白血病细胞定向分化是治疗白血病的一种手段。在CML经典细胞系K562细胞中，过表达HES6促进K562细胞向红系分化。基于以上研究成果，表明HES6与慢性粒细胞白血病的诊断和治疗密切相关，HES6是一个可用于治疗慢性粒细胞白血病新的分子靶标，开发针对该靶标的治剂将推动CML的治疗。

发明内容

本发明是针对诱导慢性粒细胞白血病定向进行红系分化，提供一种新的治疗慢性粒细胞白血病的分子靶标HES6及其应用方法，该分子的发现将推动慢性粒细胞白血病的治疗。

作为一个调控分子，HES6在不同的肿瘤中的表达和功能均具有异质性。本发明人课题组长期研究血液肿瘤，在慢性粒细胞白血病上有一定的研究基础，本发明人率先研究了HES6与慢粒的关系；通过检测大量的慢粒初诊病人样本及对照样本，发现了HES6在这两种样本中的表达差异；在这个基础上，深入探究了HES6在K562细胞中的功能。

一种治疗慢性粒细胞白血病的新治剂及其应用方法，该治剂针对的分子标志物为HES6，位于人类染色体2q37.3。

本发明提供一种用于慢性粒细胞白血病早期诊断试剂盒，其包括基于HES6的检测引物，其特征在于所述引物的序列如下：

HES6正向引物：CTGCCGGCTACATCCAGTG

HES6负向引物：CCCAGCAGATCCTGGAAGC。

所述的用于慢性粒细胞白血病早期诊断试剂盒，采用real time PCR，检测CML初诊患者HES6基因表达，并相对于正常人而言，HES6在CML患者中的表达明显下降。这是基于本发明人研究发现相较于正常人，HES6在CML初诊患者中的表达显著下降。

进一步采用GAPDH作为内对照，其中采用下述引物：

GAPDH正向引物：CATGAGAAGTATGACAACAGCCT

GAPDH负向引物：AGTCCTTCCACGATACCAAAGT。

所述real time PCR反应体系如下：