[发明专利]基于碳量子点和金纳米颗粒的荧光共振能量转移检测氧化损伤DNA的方法有效
| 申请号： | 201710493253.0 | 申请日： | 2017-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN107287297B | 公开（公告）日： | 2021-04-06 |
| 发明（设计）人： | 叶伟伟;陈畑;毛燚杰;孙培龙 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6804 | 分类号： | C12Q1/6804 |
| 代理公司： | 杭州斯可睿专利事务所有限公司 33241 | 代理人： | 王利强 |
| 地址： | 310014 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 量子 纳米 颗粒 荧光 共振 能量 转移 检测 氧化 损伤 dna 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种非疾病诊断目的的基于碳量子点和金纳米颗粒的荧光共振能量转移检测氧化损伤DNA的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：
(1)CQDs表面生物功能化处理：在表面氨基化的CQDs溶液中加入戊二醛，所述CQDs溶液和戊二醛的体积比为：(100～300)：(1～6)；静置10～40min后，加入带有8-OHdG的氧化损伤DNA，4℃下保存备用；
CQDs的浓度为25μg/mL,戊二醛的质量分数为50％，氧化损伤后带有8-OHdG的DNA的浓度范围为100pM～10μM；
(2)AuNPs制备和表面生物功能化处理：利用柠檬酸钠还原高氯金酸的方法制备AuNPs，8-OHdG抗体通过抗体上的氨基端连接到制备得到的AuNPs表面，AuNPs和8-OHdG抗体的物质的量比为1:10～1:50；
8-OHdG抗体浓度为1mg/mL，AuNPs浓度为5～10nM；
(3)氧化损伤DNA的测定：将8-OHdG抗体修饰的AuNPs溶液加入到氧化损伤DNA修饰的CQDs溶液中，每100μL～300μL CQDs溶液，戊二醛的体积为1μL～6μL，所述8-OHdG抗体修饰的AuNPs溶液的体积为10～50μL；孵育0.5～2小时后进行荧光强度测定。
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