[发明专利]一株哈茨木霉及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物发酵技术领域，尤其涉及禽畜粪便复合微生物腐熟技术领域。

背景技术

随着养殖业数量的增多和生产规模的不断扩大，畜禽粪便的排放量也随之提高，大量的畜禽粪便如果不经处理就排放到环境中，不仅污染了环境，而且也会导致病原菌的扩散，严重危害了畜禽和人类的健康。因此，需要利用微生物技术对畜禽粪便进行处理并消灭病原菌的扩散。

发明内容

本发明的第一目的是提供一株哈茨木霉(Trichodema harzianum)lzz-001，已于2017年3月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCC No.13764。

本发明所提供的哈茨木霉(Trichodema harzianum)lzz-001 CGMCC No.13764：

(1)菌种获得

1)、将从山东采集的秸秆腐熟样品在PDA培养基上进行稀释分离培养。

2)、将分离培养基上生长较快的一株纯化到新的PDA培养基上。

3)、利用28s rDNA序列进行分子鉴定，鉴定为哈茨木霉菌，编号为lzz-001。

(2)菌株功能鉴定

1)、从市面上购买其它公司的哈茨木霉菌与分离的哈茨木霉菌lzz-001分别与其它菌剂按比例混合。

2)、将制得的混合菌剂进行秸秆腐熟，发现含有分离的哈茨木霉菌lzz-001的效率更高。

本发明的第二目的提供一种禽畜粪便复合微生物腐熟菌剂，活性成分为哈茨木霉(Trichodema harzianum)lzz-001 CGMCC No.13764，包括：哈茨木霉lzz-001、戊糖片球菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉、酿酒酵母，其质量比为：4:3:1:1:1。

其中，孢子含量分别是≥100亿/克的哈茨木霉菌；≥200亿/克的戊糖片球菌；≥1000亿/克的枯草芽孢杆菌；≥100亿/克的米曲霉；≥200亿/克的酿酒酵母。

本发明的第三目的是提供了一种禽畜粪便复合微生物腐熟菌剂的制备方法，包括：

(1)将哈茨木霉lzz-001接种于9cm的PDA培养基平板中，待木霉长满平板后。

(2)将长满木霉的平板切块，大小0.5cm*0.5cm，接种与液体PDA培养基中，350ml接种2块。27℃培养3d，作为液体种备用。

(3)将麦麸加水，湿度20％，121℃灭菌20min。作为固体培养基。

(4)350ml接种到6kg固体培养基上，27℃暗培养7d。

(5)将发酵好的木霉菌剂40℃烘干，水分15％以下，烘干后将菌剂粉碎。

(6)复合微生物腐熟菌剂孢子含量分别是≥100亿/克的哈茨木霉菌；≥200亿/克的戊糖片球菌；≥1000亿/克的枯草芽孢杆菌；≥100亿/克的米曲霉；≥200亿/克的酿酒酵母。

(7)五种菌：≥100亿/克的哈茨木霉菌；≥200亿/克的戊糖片球菌；≥1000亿/克的枯草芽孢杆菌；≥100亿/克的米曲霉；≥200亿/克的酿酒酵母。

(8)将五种粉剂菌剂按质量比：哈茨木霉4：枯草芽孢杆菌3：戊糖片球菌1：米曲霉1：酿酒酵母1，混合均匀。

本发明的禽畜粪便复合微生物腐熟菌剂可以快速去除臭味，缩短发酵时间，腐熟的有机肥可以提高肥力，减少病虫害。

具体实施方式：

现结合具体实施方式和实施例说明本发明，但发明不限于以下内容。

本发明公开的复合微生物菌剂是由以保藏号为13764的哈茨木霉lzz-001，配以戊糖片球菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉、酿酒酵母复配而成。孢子含量分别是≥100亿/克的哈茨木霉菌；≥200亿/克的戊糖片球菌；≥1000亿/克的枯草芽孢杆菌；≥100亿/克的米曲霉；≥200亿/克的酿酒酵母。按重量百分比分别是哈茨木霉40％，枯草芽孢杆菌30％，戊糖片球菌10％，米曲霉10％，酿酒酵母10％。

本发明提供了一种禽畜粪便复合微生物腐熟菌剂的生产方法，所述方法包括：

(1)将哈茨木霉lzz-001接种于9cm的PDA培养基平板中，待木霉长满平板后。

(2)将长满木霉的平板切块，大小0.5cm*0.5cm，接种与液体PDA培养基中，350ml接种2块。27℃培养3d，作为液体种备用。

(3)将麦麸加水，湿度20％，121℃灭菌20min。作为固体培养基。

(4)350ml接种到6kg固体培养基上，27℃暗培养7d。