[发明专利]丹参组织培养过程中丛芽壮苗的培养工艺在审

专利信息
申请号: 201710498167.9 申请日: 2017-06-26
公开(公告)号: CN107232057A 公开(公告)日: 2017-10-10
发明(设计)人: 巢晓峰;盛益龙 申请(专利权)人: 常州市孟河双峰中草药科技有限公司
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 南京正联知识产权代理有限公司32243 代理人: 郭俊玲
地址: 213139 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 丹参 组织培养 过程 中丛芽 壮苗 培养 工艺
【权利要求书】:

1.丹参组织培养过程中丛芽壮苗的培养工艺,其特征在于,包括以下步骤:

1)培养基的配制

a、激素母液配制:称取6-BA0.1g,用5mL 1M NaOH引溶,再用纯水定容至100mL,即为浓度为1.0mg/mL的6-BA母液;称取GA30.1g,用5mL 1M NaOH引溶,再用纯水定容至100mL,即为浓度为1.0mg/mL的GA3母液;

b、激素抽滤灭菌:将滤膜放进抽滤头,高压灭菌,带进超净台,将6-BA、GA3抽滤灭菌,备用;

c、配制培养基基本成分:MS+30g/L蔗糖+5.26g/L琼脂,pH5.8;高压灭菌;带入超净台备用;

d、添加激素:在超净台上用无菌的移液抢吸取6-BA加入到基本培养基里,使其浓度为1.0mg/L,换取枪头继续吸取GA3入到基本培养基里,使其浓度为0.2mg/L,混匀;

e、分装:将添加好激素的培养基分装到无菌的组培瓶中,每瓶30~40mL,成分为:MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/LGA3+30g/L蔗糖+5.26g/L琼脂,pH5.8;

2)丛生芽的选择;

3)丛生芽的处理:采用无菌处理法进行处理;

4)丛生芽的接种;

5)丛生芽的培养:接种后的丛芽放置于组培室的组培架上进行丛芽的诱导,培养条件:培养温度27±0.5℃,光照时间12h,光强3000Lx,T5植物培养灯管。

2.根据权利要求1所述的丹参组织培养过程中丛芽壮苗的培养工艺,其特征在于:所述步骤(2)“丛生芽的选择”是指愈伤置于继代培养基诱导丛生芽1个月后,选择无污染,生长良好的的丛生芽带入超净台备用,并用75%酒精棉球擦拭瓶口处。

3.根据权利要求1所述的丹参组织培养过程中丛芽壮苗的培养工艺,其特征在于:所述步骤(3)“丛生芽的处理”是用无菌的镊子将生长良好的丛生芽镊起,置于无菌的接种盘上,用无菌的剪刀减去底部黑色或褐色的部分,用剪刀和镊子将丛芽分开,备用。

4.根据权利要求1所述的丹参组织培养过程中丛芽壮苗的培养工艺,其特征在于:所述步骤(4)“丛生芽的接种”用无菌的镊子将丛芽镊起,插入到所述e步骤的固体培养基上。

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