[发明专利]一种特异性抗人PCSK9的抗体及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种特异性抗人PCSK9的抗体及其应用，属于生物医药领域。

背景技术

高胆固醇血症，特别是低密度脂蛋白胆固醇的升高，与动脉粥样硬化的发生和发展密切相关。流行病学调查发现血脂异常，尤其是低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）持续偏高是诱发和促进动脉粥样硬化发生、发展的重要危险因素，与缺血性心脑血管疾病密切相关，严重威胁着人类健康。

目前临床上广泛应用的降脂药物是他汀类药物（Statins）。他汀类药物主要通过抑制内源性胆固醇合成限速酶（HMG-CoA）还原酶的活性，抑制细胞内羟甲戊酸代谢途径，致使细胞内的总胆固醇合成减少，调节肝细胞表面低密度胆固醇受体的数量和活性，增加血清中胆固醇的清除数量，进而降低总胆固醇的水平。但是，他汀类药物会引起肝脏酶异常，导致横纹肌溶解，且临床上存在着部分他汀类药物不耐受的患者。因此，开发他汀类药物以外的新型的降脂药物具有重要的意义。

近年来，前蛋白转化酶枯草溶菌素9（Proprotein convertase subtilisin /kexin type 9，PCSK9）蛋白逐渐成为了治疗高胆固醇血症的重要靶点。PCSK9是2003年发现的一个脂质代谢调节基因，它属于哺乳动物前蛋白转化酶（PC）枯草溶菌素蛋白家族。人类PCSK9基因定位于染色体1p32.3，全长为29 kb，由12个外显子构成，编码区约为2 kb，编码包含692个氨基酸残基的PCSK9酶原，其结构可分为信号肽、前结构域、催化结构域和羧基末端结构域四个部分。PCSK9在肝脏、肾脏、脑组织以及空回肠等多种组织中有表达。PCSK9的作用靶标是低密度脂蛋白受体（Low Density Lipoproteinreceptor，LDLR）。PCSK9合成分泌后与细胞膜上的LDLR结合并内吞，再进入溶酶体LDLR被降解，PCSK9正是通过在蛋白水平降解肝细胞表面LDLR，调节血浆低密度脂蛋白胆固醇（Low-density lipoproteincholesterol，LDL-C）水平，致使肝脏血脂清除能力下降，从而导致了高胆固醇血症。

研究发现，PCSK9存在两种突变，即功能获得型突变和功能缺失型突变，这两种突变均与脂质代谢异常密切相关。PCSK9功能获得型突变，降解LDLR的功能增强，LDLR减少，血液中LDL被清除的功能减弱，LDL-C水平升高，导致高胆固醇血症。PCSK9部分选择性错义突变属于此类突变。PCSK9功能缺失型突变可导致肝细胞LDLR增多、血液中的LDL摄取、降解增加，导致低胆固醇血症。功能缺失型突变可导致PCSK9蛋白自我裂解和分泌障碍，使得LDL-C降低80％～90％。

靶向PCSK9的治疗机理主要是通过PCSK9抗体与血浆中的PCSK9结合后阻止PCSK9与LDL受体特异性结合，进而增加了肝细胞表面LDLR的水平，提升了肝脏血脂清除能力。例如，安进公司的Repatha和赛诺菲与再生元联合研发的Praluent已于2016年上市，并且显示出良好的治疗效果。

然而，本领域技术人员仍然希望能够开发出全人源的高亲和力的靶向PCSK9的抗体。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明一方面提供了一种特异性抗人PCSK9的抗体，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区具有第一氨基酸序列或与所述第一氨基酸序列有85%以上的序列同源性的序列；其中，所述第一氨基酸序列包含如SEQ ID NO. 2所示的重链可变区的CDR1序列、如SEQ ID NO. 3所示的重链可变区的CDR2序列以及如SEQ ID NO. 4所示的重链可变区的CDR3序列；所述轻链可变区具有第二氨基酸序列或与所述第二氨基酸序列有85%以上的序列同源性的序列；其中，所述第二氨基酸序列包含如SEQ ID NO. 6所示的轻链可变区的CDR1序列、如SEQ ID NO. 7所示的轻链可变区的CDR2序列以及如SEQ ID NO. 8所示的轻链可变区的CDR3序列。

在本发明的一个优选实施方案中，所述第一氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，并且所述第二氨基酸序列的序列如SEQ ID NO. 5。

在本发明的一个更优选实施方案中，所述重链可变区的序列如SEQ ID NO. 1所示，并且并且所述轻链可变区的序列如SEQ ID NO. 5所示。