[发明专利]FXR拮抗剂在在制备抗HBV药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及新药研发领域，具体内容为法尼酯衍生物X受体(farnesoid X receptor，FXR)拮抗剂用于治疗HBV感染，抑制HBV复制表达，促进HBV清除，改善肝功能，降低肝癌转化风险等方面的应用。

背景技术

乙型肝炎病毒感染仍是一个全球公共卫生问题，它与人类的慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝毛玻璃病变和肝癌的发生有着密切的关系。目前，世界上有20亿人口曾被HBV感染，约3.5亿人变成慢性感染者，每年死于慢性肝炎、肝硬化及肝癌人数在50万至120万，占死因的第10位。HBV是一个3.2kb部分双链DNA包膜病毒。HBV转录受4个启动子和2个增强子调控。HBV由聚合酶、表面抗原、e抗原、核心抗原和X蛋白组成。表面蛋白主要由大蛋白、中蛋白和小蛋白组成，镶嵌在宿主细胞膜的双层脂质结构。这些表面蛋白具有相同的C端结构域，但是N端结构不同，如pre-S1是大蛋白结构成分，也是HBV进入肝细胞结构域。HBV感染分为急性感染和慢性感染，由于HBV细胞免疫的不足可造成HBV持续感染，造成慢性肝炎、肝细胞玻璃样变、纤维化、肝衰竭及肝癌。

HBV治疗目标是抑制病毒的复制表达，降低肝损伤促进肝功能恢复。目前药物主要有两类，一类是普通IFNα及长效IFNα，另一类为核苷(酸)类似物。IFNα具有很多副作用，并且只有30％病人有效。核苷(酸)类似物虽然能够快速抑制病毒，但是经常形成HBV耐药，停药后HBV复制反弹。因此，急迫需要开发新的抗病毒药物。

发明内容

本发明的目的是提供一种FXR拮抗剂在在制备抗HBV药物中的应用。

胆汁酸在HBV急慢性感染中发挥重要作用。急性HBV感染，患者体内胆汁酸浓度急剧升高，而HBV清除后血清胆汁酸水平恢复正常。在急性转为慢性HBV感染过程中，胆汁酸水平持续升高，这也说明HBV和胆汁酸之间存在着相互关系。最近研究发现，NTCP作为肝细胞摄取胆汁酸转运蛋白，又作为HBV感染肝细胞功能受体。HBV感染过程中，preS1蛋白与肝细胞膜NTCP结合，导致CYP7A1表达升高，胆汁酸水平增高及胆固醇和脂质代谢紊乱，从而形成胆汁淤积和肝损伤。升高的胆汁酸通过核受体FXR而促进HBV复制表达。核受体FXR和RXR形成异二聚体，与HBV核心启动子和增强子结合，促进HBV前基因组RNA和DNA复制中间体的合成。因此，我们认为胆汁酸促进HBV复制表达，不利于病毒清除。而我们在FXR KO小鼠证明，FXR敲除显著抑制HBV复制表达，并促进HBV清除。采用FXR拮抗剂同时可以显著抑制HBeAg表达。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：FXR拮抗剂在在制备抗HBV药物中的应用。

优选的，所述FXR拮抗剂为(Z)-Guggulsterone(CAS号39025-23-5,Sigma)。

优选的，所述药物为FXR拮抗剂或者为FXR拮抗剂和其它抗病毒药物组成的复方药物。

优选的，所述其它抗病毒药物为IFNα和/或核苷(酸)类似物等抗病毒药物。

优选的，所述药物包括FXR拮抗剂和药学上可接受的载体。

优选的，所述药物的剂型为任意一种临床可接受的剂型，如片剂、胶囊、粉末或液体制剂等剂型。

本发明提供新的药物治疗HBV感染病人，FXR受体拮抗剂抑制HBV复制表达、促进HBV清除，改善肝功能，抑制肝纤维化和肝硬化，降低向肝癌转化风险，因此，提高病人生存质量，降低社会家庭经济负担，具有广阔的应用前景。

附图说明

图1：在HepG2细胞系，转染pHBV1.3，转染后24小时加CDCA，加药后24和48小时，取上清液，ELISA检测HBeAg表达；

图2：在HepG2细胞系，转染pHBV1.3和FXR siRNA，转染后24小时加CDCA，加药后48小时，取上清液，ELISA检测HBeAg表达；

图3：在WT小鼠(C57BL/6J小鼠)和FXR^-/-小鼠，高压尾静脉注射pHBV1.3，注射后D1、D7、D14天静脉采血，ELISA检测HBeAg表达；

图4：在HepG2细胞系，转染pGL3-EN2/Cp和pRL-TK或pFXR表达质粒，转染后24小时加CDCA，转染72小时后进行双荧光素酶报告分析；

图5：在HepG2细胞中，转染pHBV1.3，24小时后加(Z)-Guggulsterone(10μM)或DMSO对照，作用48小时，收集上清液，ELISA检测HBeAg表达。

具体实施方式

实施例1