[发明专利]一种铁皮石斛内生真菌菌株及其产生的胞外多糖以及该胞外多糖的提取方法与应用

权利要求书

1. 一种铁皮石斛内生真菌菌株，其特征在于，属于腐皮镰刀霉菌，命名为Fusariumsolani D07，于2017年3月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO.M2017145。

2.一种由权利要求1所述的铁皮石斛内生真菌菌株产生的胞外多糖的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将所述铁皮石斛内生真菌菌株活化培养后，进行种子液培养，再将得到的种子液进行发酵培养；所述活化培养是采用试管斜面培养方法，于28±1℃活化培养48~72小时，培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基；所述种子液培养是采用马铃薯葡萄糖水培养基，于28±1℃、120 rpm摇床培养48~72小时；所述发酵培养是按体积百分比5%～15%的接种量将种子液接种于马铃薯葡萄糖水培养基中，于28±1℃、120 rpm摇床发酵培养7~14天；

（2）将步骤（1）发酵培养后得到的发酵液真空抽滤，得到的抽滤液进行真空浓缩、醇沉、离心，将离心得到的沉淀脱水处理、干燥后，溶于去离子水中进行透析，对透析液进行真空冷冻干燥，得到所述铁皮石斛内生真菌菌株产生的胞外多糖。

3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述真空浓缩是采用旋转蒸发仪于45℃将抽滤液浓缩为原液的1/10体积。

4. 根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述醇沉是采用浓缩液：95%乙醇=1：4的体积比混合均匀，4℃静置12~24小时；所述95%是指体积百分比。

5.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述离心是在8000rpm离心15分钟。

6.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述脱水处理是依次采用无水乙醇、丙酮和石油醚洗涤进行脱水处理；所述干燥是在温度50~55℃下进行干燥。

7. 根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，经脱水处理、干燥后的沉淀在溶于去离子水后的浓度为0.05~0.2g/mL；所述透析是采用截留分子量3500 Da透析袋蒸馏水透析24~72小时。