[发明专利]一种微生物载体的制备方法

说明书

本发明涉及微生物固定技术领域，具体涉及一种微生物载体的制备方法。本发明利用多孔棉花秸秆作为模板，以EDTA为导向剂，提高羟基磷酸钙的纯度，制得多孔高负载量羟基磷酸钙载体，并在其表面负载苔藓为微生物生长提供场所和营养，利用羟基磷酸钙的良好机械性能和极佳的生物相容性，最终制得高生物负载量的微生物载体，弥补了常见微生物载体机械性能差，生物相容性低以及生物负载量少的缺陷，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及微生物固定技术领域，具体涉及一种微生物载体的制备方法。

背景技术

固定化微生物技术自问世以来，显示出广阔的发展前景。固定化微生物在乙醇发酵工业上成果较为显著，固定化酵母菌用于发酵酒精与传统发酵工艺相比，具有速度快、周期短、生产能力高、工艺设备简单，易于实现连续化及自动化和产物容易提取等优点，并在一定程度上减少发酵工厂的设备投资和环境污染。

选择适宜的固定化微生物载体是实现工业化的关键，而载体的好坏又取决于载体的机械强度、寿命和包埋微生物细胞的容量和活性。固定载体中应用最广泛的是海藻酸钙，虽易成形、无毒、成本低廉，但强度差，使用寿命短。其它的一些天然高分子化合物，如琼脂，明胶和卡拉胶等，虽强度得到改善，但价格偏高。聚乙烯醇作为包埋载体的优点有机械强度高、化学性能稳定，但是其生物相容性差，对微生物的负载量小。

因此，发明一种既具有良好的生物相容性，又具有较强的机械强度的新型微生物载体对微生物固定技术领域具有积极的意义。

发明内容

本发明主要解决的技术问题，针对目前常见的微生物固定载体存在机械强度低、生物相容性差、微生物负载量低的缺陷，提供了一种微生物载体的制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

一种微生物载体的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：

（1）称取牡蛎壳放入水中加热煮沸处理，取出煮沸后的牡蛎壳粉碎得到牡蛎壳粉末，将牡蛎壳粉末和盐酸混合后搅拌反应，再离心处理，分离得到上层液，备用；

（2）称取棉花秸秆切割成小段，得到棉花秸秆段，将棉花秸秆段和沼液混合后静置微腐处理，微腐处理结束后粉碎并过50目筛，得到微腐棉花秸秆粉末；

（3）将微腐棉花秸秆粉末和无水乙醇混合后加热升温，搅拌反应后得到混合悬浮液，将五氧化二磷和混合悬浮液混合后超声分散处理，得到分散液，再用氨水调节分散液pH至9.0～9.5，得到前驱液；

（4）将备用的上层液和乙二胺四乙酸混合均匀得到滴加液，将滴加液滴入上述前驱液中，进行微波辐照处理，处理结束后静置陈化，过滤分离得到滤渣；

（5）将上述滤渣放入马弗炉中，保温煅烧，得到多孔羟基磷灰石支架，将细叶泥炭藓和水按等质量比混合后研磨，得到苔藓浆，将多孔羟基磷灰石支架和苔藓浆混合得到预处理混合物；

（6）将上述预处理混合物放入温室中，静置7～9天，静置结束后得到产物，用水冲洗产物15～20min，自然晾干后即得微生物载体。

根据权利要求1所述的一种微生物载体的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述的煮沸处理时间为1～2h，牡蛎壳粉末和盐酸的质量比为1:5，盐酸的浓度为0.1mol/L，搅拌反应时间为1～2h，离心处理转速为2000～3000r/min，离心处理时间为10～15min。

步骤（2）中所述的小段的长度为1～2cm，棉花秸秆段和沼液的质量比为1:3，静置微腐处理的温度为35～45℃，静置微腐处理的时间为3～5天。

步骤（3）中所述的微腐棉花秸秆粉末和无水乙醇的质量比为1：10，加热升温后的温度为40～50℃，搅拌反应时间为1～2h，五氧化二磷和混合悬浮液的质量比为1:15，超声分散处理频率为30～40kHz，超声分散处理时间为30～40min。