[发明专利]CvBV29-1基因在降低果蝇免疫力和制备免疫低下型果蝇模型中的应用

说明书

本发明公开了CvBV29‑1基因在降低果蝇免疫力和制备免疫低下型果蝇模型中的应用，该CvBV29‑1基因是菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒的35个基因组片段中的第29个环上的第1个基因，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用转基因技术，将菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒基因CvBV29‑1转入果蝇基因组，获得了稳定遗传、纯合体的转基因果蝇品系；该转基因品系表达多分DNA病毒基因CvBV29‑1后，存在血细胞凋亡的现象，并且在受到病原物侵染时，具有明显的免疫力低的性状，在对研究昆虫免疫相关机制、增强人类免疫类药剂的筛选等方面有重要意义。

技术领域

本发明涉及分子生物学和基因工程技术领域，尤其涉及CvBV29-1基因在降低果蝇免疫力和制备免疫低下型果蝇模型中的应用。

背景技术

昆虫是目前地球陆地上最繁盛的物种类群，是人类取之不尽的资源宝库。近年来，昆虫的免疫在其基础和应用研究方面受到极大关注，通过实验来研究与昆虫免疫相关的机制、信号等问题，对害虫防治、益虫防病、开发利用抗菌物、研究人类免疫机制等有着非常重要的现实意义。

果蝇属于双翅目、果蝇属、果蝇科昆虫，约1000种。其中，果蝇具有生活史短、易饲养、繁殖快、染色体少、突变型多、易于观察等特点，被广泛地用作遗传和演化的室内外研究材料，是一种重要的模式生物。在生命科学发展的历史长河中，果蝇扮演了十分重要的角色，是十分活跃的模型生物。随着转基因技术的发展，各种转基因果蝇模型的应用也越来越广泛。

目前，转基因果蝇模型主要用于遗传学的研究、发育的基因调控的研究、各类神经疾病的研究、帕金森氏病、老年痴呆症、药物成瘾和酒精中毒、衰老与长寿、学习记忆与某些认知行为等研究中。

低免疫力果蝇模型在对研究昆虫免疫相关机制、增强人类免疫类药剂的筛选等方面有重要意义。但是，毒性较强的基因通常容易造成转基因果蝇的死亡；因此，寻找合适的毒性基因是建立免疫低下型果蝇的重要环节。

而Polydnaviruses(多分DNA病毒，PDV)是一类寄生蜂专性共生的特殊病毒，主要包括两个属：分别是存在于膜翅目茧蜂科(Braconidae)的茧蜂病毒(Bracovirus,BV)与姬蜂科(Ichneumonidae)昆虫体内的姬蜂病毒属(Ichnovirus,IV)(Turnbull,M.and B.Webb(2002).Perspectives on polydnavirus origins and evolution.Advances in Virus Research,Academic Press.58:203-254)。PDV粒子随雌蜂产卵时注入到寄生蜂的寄主体体腔内，首先侵染血细胞，随后侵染所有组织。PDV作为寄生蜂的“强力武器”(Bai,S.,X.Chen,J.Cheng,W.Fu and J.He(2005).Effects of wasp-associated factors of Cotesiaplutellae on growth and development of Plutella xylostella larvae.Acta Phytophylacica Sinica 32(3):235-240)，其主要生理功能是抑制寄主的免疫(Dupuy,C.,E.Huguet and J.M.Drezen(2006).Unfolding the evolutionary story ofpolydnaviruses.Virus Research 117(1):81-89,Strand,M.R.and G.R.Burke(2012).Polydnaviruses as symbionts and gene delivery systems.Plos Pathogens 8(7)，却不造成寄主的死亡，以保证寄生蜂的正常生长发育(Ye,Shi et al.2014)。菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒(CvBV)是国内研究较多的一种多分DNA病毒，共有35个环状DNA组成，编码一百多个毒性基因。因此，有必要对CvBV基因做更进一步地深入研究。