[发明专利]一株呕吐毒素降解菌及其应用

说明书

本发明公开一株呕吐毒素降解菌及其应用。该降解菌是选自广东省阳江市的水稻种植农田DON污染的土壤，经过含DON的富集培养基培养，再以DON为唯一碳源的无机盐培养基驯化培养、压力筛选、分离、纯化获得。名称为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)WD601，于2017年06月02日保藏于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所的广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：GDMCC No：60194。该菌在好氧条件下以DON作为唯一碳源和能源进行生长繁殖，同时将其快速降解，降解DON的稳定性良好，在优化培养基中传代5～8代，DON降解率均能达到50％以上。

技术领域

本发明涉及生物降解技术领域，具体涉及一株呕吐毒素降解菌及其应用。

背景技术

呕吐毒素(deoxynivalenol，DON)，又名脱氧雪腐镰刀菌烯醇，主要是由禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌产生的B类单端孢霉烯毒素，对谷物污染非常严重。已知DON在人类和动物中引起一系列疾病，如呕吐、拒食、腹泻、食管穿孔以及营养吸收不良等症状，其中猪对呕吐毒素最为敏感；同时，DON能使增长迅速、处于分裂状态的细胞凋亡，高浓度DON不仅能抑制动物免疫细胞增殖，还易造成妊娠期动物流产或对胚胎有致畸作用。

DON在谷物真菌毒素中检出率最高，不同地区制定了相应标准，如FDA规定食品中DON的安全标准是1mg/kg，我国在GB2715-2005和GB2761-2011中规定小麦等制品DON的允许限量不超过1mg/kg。目前，此类真菌毒素污染已对我国食品安全和农产品出口构成实际、严重负面影响，如何有效脱毒成为了亟待解决的重大社会问题。

目前，国内外谷物和饲料霉变脱毒方法主要有物理吸附法、化学脱毒法以及生物脱毒法等。物理吸附法对DON吸附可逆且效率差，还易吸附微量营养元素，造成谷类和饲料中营养物质流失；化学脱毒易残留一些潜在有毒物质，对谷物和饲料造成二次污染，因此DON传统脱毒方法在实际应用中具有一定局限性；生物脱毒法是通过微生物释放的酶作用于DON，并将其转化为更低毒性的代谢产物，由于微生物降解具有成本低、效率高、营养物质损失少，无二次污染和生态恢复性良好等优点而受到广大关注。

早期报道的DON降解菌大部分来源于动物肠道内容物，以肠道和牛瘤胃中分离出来的厌氧菌种居多。厌氧菌群虽然可以作用于DON并具有较好的降解效果，但是菌种分离纯化极其困难，且严谨与苛刻的反应条件并不适合大规模的DON生物脱毒；且所报道的几株兼性厌氧菌大部分为混合菌群，并没有将分解DON的微生物菌种进行纯种分离和鉴定。因此，亟需一种能高效降解DON的好养或兼性厌氧纯种菌，从而带动谷物和饲料中DON生物降解技术的进一步发展和应用。

发明内容

为了克服现有DON微生物降解中的缺点与不足，本发明的目的在于提供一株呕吐毒素降解菌。该菌是从受DON污染的土壤中筛选分离的、在好氧条件下能以DON为唯一碳源在无机盐培养基中生长、并可高效降解DON的呕吐毒素降解菌。

本发明的另一目的在于提供上述呕吐毒素降解菌的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

本发明提供一株呕吐毒素降解菌，菌种命名为阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)WD601，是选自广东省阳江市的水稻种植农田DON污染的土壤，经过含DON的富集培养基培养，再以DON为唯一碳源的无机盐培养基驯化培养、压力筛选、分离、纯化获得。

所述的阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)WD601的保藏信息：保藏单位：广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏日期：2017年06月02日，保藏地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所，保藏编号：GDMCC No：60194。

所述的WD601的16S rDNA与阴沟肠杆菌Enterobacter cloacae的同源性为99％。该菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO：1所示。