[发明专利]一种促进植物提前开花的草莓转录因子及其应用

说明书

本发明涉及一种促进植物提前开花的草莓转录因子及其应用，属于分子生物学中的基因工程领域，其特征在于，促进植物提前开花的草莓WRKY46基因的全长编码区序列如序列表SEQ ID NO:1所示；氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。本发明提供草莓促进植物提前开花基因FvWRKY46并用于构建FvWRKY46基因的植物表达载体，构建的植物表达载体经农杆菌转化拟南芥，获得转基因拟南芥植株并提早开花，表明该基因具有诱导拟南芥提早开花的功能。本发明为利用基因工程技术，对草莓开花时间调控提供了技术手段与理论依据，具有很大的应用价值。

技术领域：

本发明属于分子生物学、基因工程技术领域，具体涉及一种促进植物提前开花的草莓转录因子及其应用。

背景技术：

草莓是蔷薇科草莓属植物，草莓果实鲜美红嫩，果肉多汁，酸甜可口，且有特殊的浓郁水果芳香。草莓具有很高的营养价值，色、香、味俱佳。由于其独特的风味及营养物质丰富，是最为广泛的栽培浆果之一，并有‘水果皇后’美誉。

开花是植物由营养生长转变为生殖生长的重要过程，是一个重要的农艺性状，它决定着植物是否适应于特定的栽培地区及生长季节。植物开花是植物从营养生长到生殖生长变化的关键。在外界环境和内在因子的影响下，植物会在适当的时机开花进而生殖生长。通过调节开花期，使植物延迟或提前开花，可以控制植物的营养生长或生殖生长，避免逆境对作物的伤害。在最适合的时期开花可以达到最大的效益，促进资源的积累、分配及有效利用，对提高作物产量意义重大。

在长期的进化过程中，植物形成了一套完整的机制，用于调节自身的生长发育以适应或抵御外界生物和非生物胁迫，这一调控过程在分子层面上受到多基因形成的复杂网络的调控，由许多转录因子单独或协同调控实现。

转录因子也称反式作用因子，其主要功能是激活或抑制基因的转录效应(Arce etal.2008；Jain M 2008)。WRKY转录因子家族是近十几年来发现的一类植物特有的转录因子，由于其N-末端含有高度保守的WRKYGQK氨基酸序列而得名，在调控植物的生长、发育、代谢和胁迫反应中起着重要作用(Rushton et al.2010；苏琦2007)。对WRKY转录因子研究最多的是其与抗病相关的机制，主要参与生物与非生物胁迫应答和植物衰老，有关对植物发育调控的研究报道很少，仅见参与调控了种子和表皮毛的发育(余迪求等2006；于延冲等2010)。迄今为止，关于它们参与植物开花调控的研究鲜有报道。

发明内容：

(1)本发明提供了一种调控植物开花的草莓WRKY转录因子FvWRKY46，所述基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述的调控植物早花的草莓FvWRKY46基因编码的蛋白质，具有序列表中SEQ IDNO.2所述的氨基酸序列。

(2)本发明提供了含有上述草莓WRKY转录因子FvWRKY46的植物表达载体pRI101-GFP。将FvWRKY46基因克隆到pRI101-GFP，获得pRI101-GFP-CaMV35S-FvWRKY46。

(3)本发明所述基因FvWRKY46在培育早花植物中的应用。具体是将FvWRKY46基因通过表达载体转入目的植物内。所述植物优选是模式植物拟南芥。

(4)本发明的有益效果：利用现有的植物基因工程技术，利用基因表达分析、基因克隆及序列分析技术，分离鉴定了草莓开花相关基因序列信息，并通过农杆菌介导的转化法将该基因转入拟南芥，鉴定证明转基因植株的抽薹及开花时间明显早于野生型(图5)，说明FvWRKY46参与调节植物的开花过程。

附图说明：

图1FvWRKY46基因编码区序列的扩增结果。

图2荧光定量PCR分析不同组织器官中FvWRKY46基因的表达情况。

图3重组载体pRI101-GFP-CaMV35S-FvWRKY46的构建。