[发明专利]稳定过表达LAT3的β细胞株的制备方法及其应用有效
申请号: | 201710532909.5 | 申请日: | 2017-07-03 |
公开(公告)号: | CN107200779B | 公开(公告)日: | 2020-04-03 |
发明(设计)人: | 李全宏;刘桂梅 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C12N15/12;C12N15/867;C12N5/10 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100086 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 稳定 表达 lat3 细胞株 制备 方法 及其 应用 | ||
1.L型氨基酸转运载体3和亮氨酸在如下(1)或(2)中的应用:
(1)制备调控胰岛素分泌的产品;
(2)制备调控胰岛β细胞胰岛素分泌的产品;
所述L型氨基酸转运载体3的氨基酸序列如序列2所示。
2.与L型氨基酸转运载体3相关的生物材料与亮氨酸在如下(1)-(3)中任一种中的应用:
(1)制备调控胰岛素分泌的产品;
(2)制备调控胰岛β细胞胰岛素分泌的产品;
(3)制备胰岛素分泌量提高的转基因细胞;
所述生物材料为下述A1)至A12)中的任一种:
A1)编码L型氨基酸转运载体3的核酸分子;
A2)含有A1)所述核酸分子的表达盒;
A3)含有A1)所述核酸分子的重组载体;
A4)含有A2)所述表达盒的重组载体;
A5)含有A1)所述核酸分子的重组微生物;
A6)含有A2)所述表达盒的重组微生物;
A7)含有A3)所述重组载体的重组微生物;
A8)含有A4)所述重组载体的重组微生物;
A9)含有A1)所述核酸分子的转基因细胞系;
A10)含有A2)所述表达盒的转基因细胞系;
A11)含有A3)所述重组载体的转基因细胞系;
A12)含有A4)所述重组载体的转基因细胞系;
所述L型氨基酸转运载体3的氨基酸序列如序列2所示。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:A1)所述核酸分子为序列1所示的cDNA分子或DNA分子。
4.根据权利要求1-3中任一种中的应用,其特征在于:所述调控为促进。
5.一种制备亮氨酸处理后可提高胰岛素分泌量的转基因细胞的方法,包括提高受体细胞中L型氨基酸转运载体3的表达量和/或活性,得到转基因细胞的步骤;所述转基因细胞的胰岛素分泌量高于受体细胞;
所述L型氨基酸转运载体3的氨基酸序列如序列2所示。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述提高受体细胞中L型氨基酸转运载体3的表达量和/或活性的方法为在受体细胞中过表达L型氨基酸转运载体3;
所述过表达的方法为将所述L型氨基酸转运载体3的编码基因导入受体细胞;
所述L型氨基酸转运载体3的编码基因通过表达L型氨基酸转运载体3的慢病毒质粒导入受体细胞。
7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于:所述受体细胞为胰岛β细胞;所述胰岛β细胞具体为RIN-M5F细胞。
8.按照权利要求5-7中任一所述的方法制备得到的转基因细胞。
9.一种促进胰岛素分泌的产品,其活性成分为由L型氨基酸转运载体3与亮氨酸组成的组合物;
所述L型氨基酸转运载体3的氨基酸序列如序列2。
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