[发明专利]一种检测含有糖链生物分子的试剂及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种检测含有糖链生物分子的试剂及其制备方法和应用，属于功能化高分子材料技术领域。一种检测含有糖链生物分子的试剂，原料包括以下物质：树枝状聚合物、含有硼酸和基官能团的化合物以及含有基和可直接检测官能团的化合物或含有基和可被间接检测官能团的化合物，其中R可为烷基、羟基、氢、卤素、烷氧基中的一种或多种；所述树枝状聚合物具有2个或2个以上胺基；所述含有硼酸和基官能团的化合物通过基与树枝状聚合物上的胺基发生化学键合反应进行结合；所述含有基和可直接检测官能团的化合物或含有基和可被间接检测官能团的化合物通过基与所述树枝状聚合物上的胺基发生化学键合反应进行结合。所述试剂具有可溶性。

技术领域

本发明属于功能化高分子材料技术领域，具体涉及一种检测含有糖链生物分子的试剂及其制备方法和应用。

背景技术

生物分子广泛存在着糖链修饰，例如，糖类、核苷、核苷酸、糖基化蛋白、糖基化肽段等，它们在细胞信号传导、代谢调节、免疫功能调控等重要的生命过程中扮演着作用，许多含有糖链的生物分子是疾病、甚至癌症的发生、发展的生物标记物或药物治疗靶点，如胚胎抗原、组织特异性抗原等，又如E-钙黏蛋白的表达水平与肿瘤侵袭能力密切相关。因而，发展可对含有糖链的生物分子进行直接检测的方法对于癌症的早期预警、靶向治疗等具有重要意义。

硼酸亲和色谱的作用原理是利用硼酸基团与1,2或1,3-邻二羟基化合物的可逆性相互作用。在高pH值下，硼酸基团可以与1,2或1,3-邻二羟基化合物形成环状酯，该酯在低pH值下可以发生可逆的解离。利用这种可逆性相互作用来实现糖类、糖蛋白、糖肽、核苷、核苷酸等具有1,2或1,3-邻二羟基结构的重要生物分子分离分析的功能材料越来越受到了广泛关注。

目前，采用上述硼酸亲和色谱的作用原理制备出多种富集材料，例如专利号为201210329785.8、201310096122.0和201410856918.6等专利在磁性载体表面引入树枝状聚合物后再经硼酸功能化得到了树枝状硼酸功能化磁性微球，并用于含有顺式二羟基的生物分子，特别是糖蛋白的富集、纯化和分离。但该树枝状硼酸功能化磁性微球是基于固相的，只能用于基于固液分离的糖链生物分子的捕集，也就是说把溶液中的糖链生物分子从溶液中“抓”到固相载体上，再通过其他方式把“抓”到的糖链生物分子从该固相载体上洗脱下来，这样的方式不能实现糖链生物分子的直接检测。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种检测含有糖链生物分子的试剂及其制备方法和应用，利用所述试剂，可以对含有糖链的生物分子进行特异性、高灵敏度地定性和定量的检测，并且所述试剂的制备及应用方法简单、易行、省时、重复性好。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种检测含有糖链生物分子的试剂(A-D-B)，原料包括以下组分：树枝状聚合物(D)、含有硼酸和基官能团的化合物(B)以及含有基和可直接检测官能团的化合物或含有基和可被间接检测官能团的化合物(A)；其中R可为烷基、羟基、氢、卤素、烷氧基中的一种或多种；所述树枝状聚合物具有2个或2个以上胺基；

所述含有硼酸和基官能团的化合物(B)可通过基与树枝状聚合物(D)上的胺基发生化学键合反应进行结合；

所述含有基和可直接检测官能团的化合物或含有基和可被间接检测官能团的化合物(A)通过基与所述树枝状聚合物(D)上的胺基发生化学键合反应进行结合。

优选的，树枝状聚合物(D)为聚酰胺-胺型树枝状聚合物或含聚酰胺-胺型树枝状聚合物的嵌段聚合物。

优选的，聚酰胺-胺型树枝状聚合物为第二代到第十代中的一代或几代。

优选的，含有基和可直接检测官能团的化合物(A)中所述可直接检测官能团为荧光官能团或发光官能团。