[发明专利]拮抗黄芪根腐病的芽孢杆菌菌株及其发酵培养基

说明书

本发明提供一种拮抗黄芪根腐病的细菌菌株及其发酵培养基，属于微生物技术领域。所述菌株，它是保藏号为CGMCC No.14244的甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。所述菌株的发酵培养基，其配方为：葡萄糖20.0～25.0g/L、胰蛋白胨20.0～25.0g/L、花生饼粉15.0～25.0g/L、CaCO₃ 2.0～2.2g/L、MnSO₄ 0.0005～0.0006％。所述菌株培养物对黄芪根腐病菌(Fusarium solani和Fusarium acuminatum)抑制作用显著，离体防病试验中，在不同的处理组下，均具有明显的保护、治疗和拮抗防病效果。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体提供一株能够拮抗黄芪根腐病菌(Fusariumacuminatum、Fusarium solani)和具有促进植株生长能力的芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)SXKF16-2及其发酵培养基。

背景技术

黄芪是我国中药方剂中的大宗药材，性温，味甘，具补气固表，托疮生肌等功效，被广泛用于临床各科，素有“十药八芪”之称。由于黄芪极高的药用价值，以及其药理作用研究的不断深入、药用范围的不断拓宽，国内外市场对黄芪的需求量日益增大。

黄芪主产于甘肃、内蒙、山西等地。近年来，随着种植面积的扩大，轮作周期缩短，重茬和迎茬面积增加，致使黄芪根腐病在上述主产区均已普遍发生，且危害逐年加重，成为制约黄芪产业可持续发展的重要因素。根腐病是一类极具毁灭性的土传病害，素有“植物癌症”之称。在黄芪上，更是因其多年生特性，积重难返、难以防控。黄芪根腐病由多种病原菌混合侵染引起，主要包括腐皮镰孢菌(Fusarium solani)、锐顶镰刀菌(Fusariumacuminatum)、尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、链铬孢属真菌等(Alternariaspp.)等，镰刀菌为最主要的致病菌属。

目前，化学防治作为黄芪根腐病最主要的防治方法，虽然见效快、作用强，但化学农药高毒性、高残留、高污染的特点，极易导致病菌抗药性增加、生态系统破坏。同时，还可导致有效成分含量的降低，严重影响临床用药安全和国际市场竞争力。为了避免中药材病害防治中的农药污染，保证绿色生产，国家制定了一系列的无公害生产条例，并在《中药材GAP栽培技术》中明确规定了禁止使用的剧毒农药和部分高毒农药。

与化学农药相比，生物防治因具有对非靶标生物安全，毒副作用小，环境兼容性好，生产原料来源广泛等优点而越来越受到重视。因此，黄芪根腐病的防控应首先立足于生物防治，特别是生物农药的推广和使用，而获得高效拮抗菌是生物农药开发的基础。芽孢杆菌作为土壤和植物微生态区系的优势生物种群，具有很强的抗菌防病及抗逆能力，特别是由于其在定殖力、繁殖力、稳定性、以及与化学农药的相容性等方面，明显优于非芽孢杆菌和真菌，因而在土传病害的生物防治中更是显示出了极高的应用价值。

目前，国内外利用芽孢杆菌防治大田作物根部病害的报道有很多，且不少制剂已商业化。已报道的生防芽孢杆菌有：枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、多粘芽孢杆菌(B.polymyxa)、蜡状芽孢杆菌(B.cereus)、蜡状芽孢杆菌蕈状菌变种(B.cereusvar.mycoides)、巨大芽孢杆菌(B.megaterium)和短小芽孢杆菌(B.pumilus)等。已投放市场并用于大田作物和蔬菜土传病害防治的芽孢杆菌制剂主要包括：美国的枯草芽孢杆菌制剂GB03、MBI600、QST713和解淀粉枯草芽孢杆菌变种(B.subtilis var.amyloliquefaciensFZB24)制剂等；国内的枯草芽孢杆菌制剂则有“百抗”、“麦丰宁”、“纹曲宁”等，但针对中药材土传病害仅有一种芽孢杆菌制剂(登记证号LS2001821)可用于三七根腐病防治。

因此，根据黄芪产业发展和根腐病防治的实际需要，筛选获得对黄芪根腐病具显著抑制作用，且兼具促生功能的芽孢杆菌，对开发黄芪根腐病专用芽孢杆菌生防制剂，实现中药材土传病害的生物防治，具有十分重要的意义。