[发明专利]一种提高新疆雪莲愈伤组织多酚生物合成的方法

说明书

本发明公开了一种提高新疆雪莲愈伤组织多酚生物合成的方法，包括将继代培养获得的新疆雪莲愈伤组织接种在含有N‑苯基‑N′‑1，2，3‑噻二唑‑5‑脲和6‑苄氨基腺嘌呤的MS培养基上，然后在低压和挥发性酸熏蒸的环境中进行新疆雪莲愈伤组织多酚生物合成的诱导培养，从而显著提高新疆雪莲愈伤组织多酚的生物合成量，可用于新疆雪莲多酚类化合物生物合成的研究。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及多酚的生物合成，具体涉及一种提高新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar.et Kir.ex Maxim)愈伤组织多酚生物合成的方法。

背景技术

植物多酚是一类广泛存在于植物体内的植物次生代谢物质，是由1个或多个芳香环和2个以上酚羟基组成的单体分子到高聚合化合物的统称。自然界中的多酚非常丰富，已分离鉴定出多酚类物质有2万多种，植物多酚不但为植物带来五彩缤纷的颜色，也赋予植物苦、涩等多种味道。植物多酚广泛存在于蔬菜、水果、豆类、谷物类等植物中。也存在于茶叶、啤酒、果汁等饮料中，与人类的生活和健康密切相关。近年来发现植物多酚能够抑制动物和人类肿瘤的发展，防治心脑血管疾病以及抗炎、抗癌、抗氧化、抗衰老等作用。而近年来，越来越多的研究证实,植物多酚在植物抗逆境生理生态上也具有重要的作用。引起了人们广泛的关注以及研究利用多酚的极大兴趣。

新疆雪莲属菊目，菊科，风毛菊属，雪莲亚属，是一种多年生的草本植物，主要生长于我国西部海拔2400-3470米的高寒地区，具有通经活血、散寒除湿、止血消肿、排体内毒素等功效，素有“百草之王”的美称。由于生长环境恶劣，它的生长周期很长，在自然条件下五年才能开花，因此数量稀少,是十分珍贵的中药资源。近年来由于滥采滥挖，新疆雪莲已经濒临灭绝。人们希望应用生物技术开发出新产品以代替这种稀缺的天然药材，获得药效物质，满足市场需求。于是新疆雪莲细胞培养物为人们寄予厚望，有望在药用或保健食品领域成为天然雪莲的代替资源。

人们对通过新疆雪莲细胞培养生产黄酮类化合物已经进行了多方面的研究，但是对通过新疆雪莲细胞培养生产多酚类化合物尚未深入的研究。

发明内容

针对现有技术中的缺陷和不足，本发明的目的在于提供一种提高新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar.et Kir.ex Maxim)愈伤组织多酚生物合成的方法，可用于新疆雪莲多酚类化合物生物合成的研究。

为了实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案：

一种提高新疆雪莲愈伤组织多酚生物合成的方法，包括将继代培养获得的新疆雪莲愈伤组织接种在含有N-苯基-N′-1，2，3-噻二唑-5-脲和6-苄氨基腺嘌呤的MS培养基上，然后在低压和挥发性酸熏蒸的环境中进行新疆雪莲愈伤组织多酚生物合成的诱导培养。

具体的，所述的继代培养获得的新疆雪莲愈伤组织是指继代培养20～30天的新疆雪莲愈伤组织。

具体的，所述的含有N-苯基-N′-1，2，3-噻二唑-5-脲和6-苄氨基腺嘌呤的MS培养基是指含0.5mg/L的N-苯基-N′-1，2，3-噻二唑-5-脲和2.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤的MS固体培养基。

最好的，所述的挥发性酸是盐酸或醋酸。

更好的，盐酸的浓度为0.2mol/L，盐酸的熏蒸剂量是50～150μl；醋酸的浓度为0.2mol/L，醋酸的熏蒸剂量是100～300μl。

一种可行的方案，所述的挥发性酸的熏蒸方式是在愈伤组织周围的培养基上进行滴加。

还具体的，所述的低压是指大气压力值为30～50kP。

最好的，进行新疆雪莲愈伤组织多酚生物合成的诱导培养的培养时间为4～10天。